Question

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：

注：圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來(lái)       ，因?yàn)橛蓛煞N不同限制酶切割后形成的黏性末端            。
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多的方法是        。如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是                  。
（3）可以利用基因工程的方法對(duì)豬的器官進(jìn)行改造，將器官供體基因組導(dǎo)入         ,以抑制            ，或設(shè)法除去             ，再結(jié)合克隆技術(shù)，培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。
（4）以下有關(guān)綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的敘述正確的是

A．該轉(zhuǎn)基因克隆豬的絕大部分性狀同受體母豬

B．綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬一定是雌性的

C．受體母豬對(duì)移入的早期胚胎一般不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)

D．綠色熒光蛋白基因常取自水母的基因組文庫(kù)

（5）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是：        （用數(shù)字表示）。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

Answer 1

（1）可以連接（2分）    相同（或互補(bǔ)）（2分）
（2）顯微注射技術(shù)（2分）   為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因（2分）
（3）某種調(diào)節(jié)因子   抗原決定基因的表達(dá)   抗原決定基因
（4）C（2分）
（5）②①③④（2分）

解析試題分析：
（1）限制酶 Ⅰ和Ⅱ切割后產(chǎn)生的黏性末端相同,即均產(chǎn)生GATC 序列, 因此可以用DNA 連接酶連接起來(lái)。
（2）目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最常用的方法是顯微注射技術(shù)。GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，可用于鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因。
（3）將器官供體基因組導(dǎo)入某種調(diào)節(jié)因子,以抑制抗原決定基因的表達(dá)，或設(shè)法除去抗原決定基因，再結(jié)合克隆技術(shù)，對(duì)豬的器官進(jìn)行改造，可培育出沒(méi)有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆豬器官。
（4）轉(zhuǎn)基因克隆豬的絕大部分性狀同提供細(xì)胞核的個(gè)體相同，A錯(cuò)誤；綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的性別也同提供細(xì)胞核的個(gè)體相同，B錯(cuò)誤；胚胎移植之所以成功，原因之一是受體母豬對(duì)移入的早期胚胎一般不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，C正確；綠色熒光蛋白基因常取自水母的cDNA文庫(kù)，D錯(cuò)誤。
（5）蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是：藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)，推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列，藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成），表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。
考點(diǎn)：本題考查基因工程與細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程的知識(shí)。意在考查能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能用文字、圖表以及數(shù)學(xué)方式等多種表達(dá)形式準(zhǔn)確地描述生物學(xué)方面的內(nèi)容。能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力。