Question

（10分）Ⅰ、將動(dòng)物致病菌的抗原基因?qū)�入馬鈴薯制成植物疫苗，飼喂轉(zhuǎn)基因馬鈴薯可使動(dòng)物獲得免疫力。以下是與植物疫苗制備過程相關(guān)的圖和表。

請(qǐng)根據(jù)以上圖表回答下列問題：
（1）在采用常規(guī)PCR方法擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶不同于一般生物體內(nèi)的DNA聚合酶，其最主要的特點(diǎn)是                         。
（2）PCR過程中退火（復(fù)性）溫度必須根據(jù)引物的堿基數(shù)量和種類來設(shè)定。表1為根據(jù)模板設(shè)計(jì)的兩對(duì)引物序列，圖2為引物對(duì)與模板結(jié)合示意圖。請(qǐng)判斷哪一對(duì)引物可采用較高的退火溫度？__________。
（3）圖1步驟③所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列是否有專一性要求？  。
（4）為將外源基因轉(zhuǎn)入馬鈴薯，圖1步驟⑥轉(zhuǎn)基因所用的細(xì)菌B通常為              。（2分）
Ⅱ、繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。請(qǐng)回答：
（1）將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入小鼠受體細(xì)胞，常用方法是               。
（2）進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí)，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入        中，通常采用         技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組。
（3）在研制膀胱生物反應(yīng)器時(shí)，應(yīng)使外源基因在小鼠的                 （2分）細(xì)胞中特異表達(dá)。

Answer 1

Ⅰ⑴耐高溫 ⑵引物對(duì)B ⑶否 ⑷農(nóng)桿菌（2分）
Ⅱ⑴顯微注射 ⑵受精卵（或早期胚胎）、DNA雜交 ⑶膀胱上皮

解析試題分析：Ⅰ⑴ PCR方法擴(kuò)增目的基因的過程中，使用的DNA聚合酶具有耐高溫的特性。⑵引物B中含C與G的堿基對(duì)較多，可采用較高的退火溫度。⑶多種限制酶切割，形成不同的切割位點(diǎn)，所用的DNA連接酶對(duì)所連接的DNA兩端堿基序列就沒有專一性要求。⑷植物基因工程中常用農(nóng)桿菌做受體細(xì)胞。（5）據(jù)圖分析，用到了EcoR I酶和Alu I酶切割抗原DNA片段產(chǎn)生了X、Y兩個(gè)片段，而用EcoR I酶和SmaI酶切割質(zhì)粒產(chǎn)生了 M、N兩個(gè)片段，且M、N片段間存在Pst I酶切點(diǎn)。因此再用EcoRⅠ和PstⅠ酶切割這兩片段形成的重組質(zhì)粒，由于保留了Pstl的切割位點(diǎn)，所以可以得到兩種DNA分子。而用EcoRⅠ和SmaⅠ酶切重組質(zhì)粒中，如圖I-②過程只能產(chǎn)生一種DNA片斷。Ⅱ基因工程所用的基本工具有限制性內(nèi)切酶、dna連接酶和運(yùn)載體，其中，常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒，也可用噬菌體衍生物和動(dòng)植物病毒。在動(dòng)物細(xì)胞工程中，若將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞，常用胰蛋白酶和膠原蛋白酶來處理；若進(jìn)行核移植，需先對(duì)卵母細(xì)胞培養(yǎng)到mⅱ中期并做去核處理；動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)需要無(wú)菌無(wú)毒條件，一定的營(yíng)養(yǎng)條件，血漿血清和o₂、co₂氣體條件，其中的氣體co₂主要用于維持培養(yǎng)液的ph。在動(dòng)物胚胎工程中，常用促性腺激素處理雌性個(gè)體而使其超數(shù)排卵；常采用核移植和早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)獲得重組胚胎，并進(jìn)一步培育出克隆動(dòng)物，常采用胚胎分割并移植技術(shù)獲得更多的優(yōu)良個(gè)體。
考點(diǎn)：Ⅰ本題考查運(yùn)用PCR方法擴(kuò)增目的基因的有關(guān)知識(shí)以及圖解的識(shí)別能力，尤其是限制酶的作用是解答本題的難點(diǎn)和關(guān)鍵點(diǎn)。Ⅱ本題綜合考查基因工程的基本工具、動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的基礎(chǔ)知識(shí)，考查識(shí)圖、獲取信息與處理信息的能力。通過圖形對(duì)限制酶作用的特點(diǎn)來加深對(duì)知識(shí)理解和掌握。