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以下是四種不同限制酶切割形成的DNA片段：     

(1)…CTGCA  

(2)…AC   

(3)GC…

(4)…G     

(5)    G…    

(6) …GC…G          …TG      CG…        …CTTAA     ACGTC…          …CG

(7) GT…     

(8)AATTC…  CA…             G…

請用DNA連接酶將它們連接起來:

____和_____能連接成_________________________                             ;

____和_____能連接成_________________________                             ;

____和_____能連接成_________________________                             ;

____和_____能連接成_________________________                             ;

以下是四種不同限制酶切割形成的DNA片段。

你是否能用DNA連接酶將它們連接起來？

14分）、某質粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程如下圖所示，請回答下列問題。

(1)將抗鹽基因導入煙草細胞內,使煙草植株產生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于______                          。

(2)如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞,一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能復制，也不能______                    。

(3)在構建重組質粒時,應選用______       和_____        _兩種酶對______           和_____               _進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

(4)基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，下圖表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達載體是否導入了農桿菌。

培養(yǎng)基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有______       、_____             _。從檢測篩選的結果分析，含有目的基因的是______       菌落中的細菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標記的______           作探針進行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌煙草植株從        水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

(5)將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要用_______          技術，愈傷組織經______               進而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質外還必須向培養(yǎng)基中添加                      。

40.  ［生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題］(15分）

某質粒上有SalI、Hi_ndm、BamHI三種限制酶切割位點，同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨 芐青霉素基因。利用此質粒獲得轉基因抗鹽煙草的過程如下圖所示，請回答下列問題。

(1)將抗鹽基因導入煙草細胞內,使煙草植株產生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來 源屬于______。

(2)如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞,一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽 基因在煙草細胞中不能______，也不能______。

(3)在構建重組質粒時,應選用______和______兩種隳對______和______進行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。

(4)  基因工程中的檢測篩選是一個重要的步驟。為篩選出導入了重組質粒的農桿菌，下圖 表示運用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢 測基因表達載體是否導入了農桿菌。

培養(yǎng)基除了含有細菌生長繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有______、______。從檢測篩選的結果分析，含有目的基因的是______菌落中的細菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標記的______作探針進行分子雜交檢測，又要用______方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

(5)將轉入抗鹽基因的煙草細胞培育成完整的植株需要 用_______技術，愈傷組織經______進而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質外還必須向培養(yǎng)基中添加                         。

下圖是利用質粒（有抗四環(huán)素基因、抗氨芐青霉素基因和Sal I、BamH I、Hind Ⅲ三種限制酶切割位點）獲得轉基因抗鹽煙草的培育過程，請據(jù)圖回答有關問題：

（1）將抗鹽基因導入煙草細胞內，使煙草植株產生抗鹽性狀，這種新性狀的產生所依據(jù)的原理是           。從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用          技術進行擴增。

（2）如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能               ，也不能合成抗鹽基因的mRNA。

（3）為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標記的             作探針進行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

（4）圖中將抗鹽基因導入質粒，需用             限制酶對質粒和                 進行切割。

（5）煙草組織細胞具有                 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術將導入抗鹽基因的煙草組織細胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的              、                    。在形成愈傷組織的過程中，細胞的新陳代謝類型是                 。

40．【生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題】（15分）

下圖是利用質粒（有抗四環(huán)素基因、抗氨芐青霉素基因和Sal I、BamH I、Hind Ⅲ三種限制酶切割位點）獲得轉基因抗鹽煙草的培育過程，請據(jù)圖回答有關問題：

（1）將抗鹽基因導入煙草細胞內，使煙草植株產生抗鹽性狀，這種新性狀的產生所依據(jù)的原理是           。從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用          技術進行擴增。

（2）如果將抗鹽基因直接導入煙草細胞，一般情況下，煙草不會具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細胞中不能               ，也不能合成抗鹽基因的mRNA。

（3）為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標記的             作探針進行分子雜交檢測，又要用一定濃度的鹽水澆灌的方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。

（4）圖中將抗鹽基因導入質粒，需用             限制酶對質粒和                 進行切割。

（5）煙草組織細胞具有                 ，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術將導入抗鹽基因的煙草組織細胞培育成植株。圖中①、②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細胞的              、                    。在形成愈傷組織的過程中，細胞的新陳代謝類型是                 。

番茄不易儲存與多聚乳糖醛酸酶（PG）有關，科學家將人工合成的反義多聚乳糖醛酸酶基因導入番茄，獲得轉基因延熟番茄，是番茄的存儲時間大大延長。已知質粒上有Pst I、Sma I 、Hind III 、 Alu I 等四種限制酶切割位點。下圖是轉基因延熟番茄培育過程的示意圖（a mpr為抗氨芐青霉素基因），其中1~ 4是培育過程中的相關步驟，I 、II是相關結構或細胞。請據(jù)圖作答。

例1 在構建含反義多聚乳糖醛酸酶基因的表達載體時，若用Sma I與Pst I完全酶切含目的基因的DNA后，反應管中有________種片段。為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，實際操作中，一般應選用限制酶___________，分別同時對_____________進行切割。
例2 通過農桿菌轉化法，可將帶有目的基因的T-DNA（重組質粒）導入番茄細胞。導入番茄細胞的目的基因，通常插入到細胞核某一條染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以____________________。上述途徑所獲得的番茄，其后代并非每一個個體都含目的基因，原因是                   。
(3) 為了檢測番茄細胞是否導入了目的基因，可以采用特定的DNA分子探針進行檢測，也可以向植物組織培養(yǎng)基中加入_______________，以篩選獲得導入上述重組質粒的特定受體細胞。
向正常番茄細胞內導入反義多聚乳糖醛酸酶基因后，發(fā)現(xiàn)多聚乳糖醛酸酶基因能正常轉錄形成mRNA，但細胞內卻不再合成多聚乳糖醛酸酶（PG），其原因最可能是____________。

番茄不易儲存與多聚乳糖醛酸酶（PG）有關，科學家將人工合成的反義多聚乳糖醛酸酶基因導入番茄，獲得轉基因延熟番茄，是番茄的存儲時間大大延長。已知質粒上有Pst I、Sma I 、Hind III 、 Alu I 等四種限制酶切割位點。下圖是轉基因延熟番茄培育過程的示意圖（a mpr為抗氨芐青霉素基因），其中1~ 4是培育過程中的相關步驟，I 、II是相關結構或細胞。請據(jù)圖作答。

例1  在構建含反義多聚乳糖醛酸酶基因的表達載體時，若用Sma I與Pst I完全酶切含目的基因的DNA后，反應管中有________種片段。為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，實際操作中，一般應選用限制酶___________，分別同時對_____________進行切割。

例2  通過農桿菌轉化法，可將帶有目的基因的T-DNA（重組質粒）導入番茄細胞。導入番茄細胞的目的基因，通常插入到細胞核某一條染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以____________________。上述途徑所獲得的番茄，其后代并非每一個個體都含目的基因，原因是                    。

 (3) 為了檢測番茄細胞是否導入了目的基因，可以采用特定的DNA分子探針進行檢測，也可以向植物組織培養(yǎng)基中加入_______________，以篩選獲得導入上述重組質粒的特定受體細胞。

向正常番茄細胞內導入反義多聚乳糖醛酸酶基因后，發(fā)現(xiàn)多聚乳糖醛酸酶基因能正常轉錄形成mRNA，但細胞內卻不再合成多聚乳糖醛酸酶（PG），其原因最可能是____________。

番茄不易儲存與多聚乳糖醛酸酶（PG）有關，科學家將人工合成的反義多聚乳糖醛酸酶基因導入番茄，獲得轉基因延熟番茄，是番茄的存儲時間大大延長。已知質粒上有Pst I、Sma I 、Hind III 、 Alu I 等四種限制酶切割位點。下圖是轉基因延熟番茄培育過程的示意圖（a mpr為抗氨芐青霉素基因），其中1~ 4是培育過程中的相關步驟，I 、II是相關結構或細胞。請據(jù)圖作答。

在構建含反義多聚乳糖醛酸酶基因的表達載體時，若用Sma I與Pst I完全酶切含目的基因的DNA后，反應管中有________種片段。為了避免目的基因和載體在酶切后產生的末端發(fā)生任意連接，實際操作中，一般應選用限制酶___________，分別同時對_____________進行切割。

通過農桿菌轉化法，可將帶有目的基因的T-DNA（重組質粒）導入番茄細胞。導入番茄細胞的目的基因，通常插入到細胞核某一條染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以____________________。上述途徑所獲得的番茄，其后代并非每一個個體都含目的基因，原因是                    。

(3) 為了檢測番茄細胞是否導入了目的基因，可以采用特定的DNA分子探針進行檢測，也可以向植物組織培養(yǎng)基中加入_______________，以篩選獲得導入上述重組質粒的特定受體細胞。

向正常番茄細胞內導入反義多聚乳糖醛酸酶基因后，發(fā)現(xiàn)多聚乳糖醛酸酶基因能正常轉錄形成mRNA，但細胞內卻不再合成多聚乳糖醛酸酶（PG），其原因最可能是____________。