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6．下列各種生理現(xiàn)象中，沒有直接涉及到細(xì)胞間信息交流的是（　�。�

	A．	精子與卵細(xì)胞的結(jié)合		B．	肝細(xì)胞表面的糖蛋白結(jié)合胰島素
	C．	興奮在神經(jīng)元之間傳遞		D．	水分子進(jìn)入細(xì)胞

5．回答有關(guān)胚胎工程的問(wèn)題：
（1）為了獲得足夠數(shù)量的卵細(xì)胞，先利用促性腺激素刺激供體雌性鼠超數(shù)排卵，然后從輸卵管沖取，獲取的精子也要進(jìn)行獲能處理，在獲能液或?qū)Ｓ檬芤褐型瓿审w外受精．
（2）早期胚胎在發(fā)育培養(yǎng)液中培養(yǎng)，當(dāng)胚胎培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段時(shí)，可進(jìn)行胚胎移植．通過(guò)胚胎分割技術(shù)可獲得遺傳物質(zhì)相同的兩個(gè)胚胎，但要將囊胚階段的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割．若要鑒定胚胎的性別，可獲取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行做鑒定．
（3）在胚胎移植前要對(duì)接受胚胎的受體進(jìn)行同期發(fā)情處理．
（4）胚胎干細(xì)胞形態(tài)上具有體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯的特性，它在添加抑制因子的培養(yǎng)液中可以維持不分化的狀態(tài)．

4．圖是制備分泌抗X抗體的過(guò)程，根據(jù)圖解回答問(wèn)題：

（1）給小鼠注射抗原的目的是產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞．
（2）在單克隆抗體制備過(guò)程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有體外無(wú)限增殖和分泌特異性抗體的特性．
（3）由圖中可看出，單克隆抗體制備過(guò)程運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞工程技術(shù)，③特有的促融方法是滅活病毒．
（4）圖中有兩次篩選過(guò)程，步驟⑤⑥的目的是篩選出能產(chǎn)生特定抗體的細(xì)胞，后者篩選的原理是抗原-抗體雜交．
（5）單克隆抗體最重要的用途是制成生物導(dǎo)彈，可在原位殺死癌細(xì)胞．

3．下面是一項(xiàng)“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要，請(qǐng)回答：
本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素．所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛密碼子的原則來(lái)設(shè)計(jì)所含的密碼子，通過(guò)人工合成若干DNA片段，拼接而成，并且在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，避免胰島素在植物細(xì)胞中的降解．將該基因置于CaMV 35S啟動(dòng)子和果實(shí)專一性啟動(dòng)子2A12的驅(qū)動(dòng)之下通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實(shí)中表達(dá)人胰島素．
（1）此基因工程中的目的基因是人胰島素基因，將人工合成的DNA片段拼接在一起，所需要的酶是DNA連接酶，T₄-DNA連接酶還可以連接平末端．
（2）要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用PCR擴(kuò)增技術(shù)（用字母）．
（3）試分析在C端加上KDEL的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)滯留序列，為什么可以避免胰島素在植物細(xì)胞中的降解？使胰島素合成后在植物內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中保存，以免在細(xì)胞內(nèi)被降解．
（4）用目的基因與農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒結(jié)合構(gòu)建表達(dá)載體，該表達(dá)載體的組成中不應(yīng)含有的是④⑦（從下列選項(xiàng)中選擇）．
①目的基因   ②CaMV 35S啟動(dòng)子  ③果實(shí)專一性啟動(dòng)子2A12   ④RNA引物
⑤標(biāo)記基因   ⑥T-DNA            ⑦RNA聚合酶基因片段      ⑧終止子
（5）若培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，用顯微注射法，將目的基因?qū)�入受精卵中．要確定目的基因是否整合到染色體上，一般需用放射性同位素標(biāo)記（或熒光分子標(biāo)記）的目的基因（單鏈）做探針，與轉(zhuǎn)基因小鼠細(xì)胞中提取的核DNA進(jìn)行分子雜交．

2．下面是以小鼠為對(duì)象進(jìn)行的研究，請(qǐng)回答問(wèn)題：
（1）在小鼠細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到細(xì)胞表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)，需要用胰蛋白酶處理．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的成分通常含有葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有動(dòng)物血清、血漿．為了防止污染，通常還要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，并且一般需將細(xì)胞置于含95%的空氣加5%CO₂的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，其作用是維持培養(yǎng)液的PH，
（2）為使外源基因在后代中長(zhǎng)期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞的細(xì)胞核轉(zhuǎn)入去核的卵細(xì)胞中構(gòu)成重組細(xì)胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個(gè)體．
（3）在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，通常在冷凍（或超低溫、液氮）條件下保存細(xì)胞，因?yàn)樵谶@種條件下，細(xì)胞中酶的活性降低，細(xì)胞的代謝速率降低．

1．如圖為牛胚胎移植的基本程序，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）圖中a、b、c過(guò)程分別是指超數(shù)排卵處理、胚胎的收集（沖卵）、胚胎移植．
（2）供體母牛的主要職能是能產(chǎn)生具有優(yōu)良遺傳特性的胚胎；受體母牛必須具備的條件是健康的體質(zhì)和健康的繁殖能力．
（3）生物技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富，生物技術(shù)的應(yīng)用帶給人類很多福音，但也存在著安全性和倫理方面的爭(zhēng)議．關(guān)于克隆技術(shù)在人類中的應(yīng)用，我國(guó)政府的觀點(diǎn)是禁止生殖性克隆不反對(duì)治療性克�。�

20．新疆是我國(guó)重要的畜牧業(yè)省區(qū)之一，但當(dāng)?shù)匮虻漠a(chǎn)肉率和產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場(chǎng)的需求，每年都要從青海等省份調(diào)進(jìn)大批羊肉．自2009年9月開始，新疆啟動(dòng)了優(yōu)質(zhì)種羊萬(wàn)枚胚胎移植工程，有4 000多只新疆本地肉用羊“懷上”并最終產(chǎn)下品質(zhì)優(yōu)良的“后代”．胚胎移植的基本程序如圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）從受精卵→胚胎→幼羊的過(guò)程體現(xiàn)了受精卵具有全能性．
（2）選擇供體母羊、供體公羊的要求是具有優(yōu)良遺傳性狀的同種羊．對(duì)供體母羊進(jìn)行超數(shù)排卵時(shí)應(yīng)注射促性腺激素．
（3）判斷是否受精的標(biāo)志是卵黃膜和透明帶間隙是否出現(xiàn)兩個(gè)極體．
（4）胚胎分割時(shí)，一般采用發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚．在對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要特別注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后的胚胎恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育．直接移植給受體母羊多個(gè)胚胎，產(chǎn)生的多個(gè)后代的基因型相同嗎？不一定；通過(guò)胚胎分割產(chǎn)生的兩個(gè)或多個(gè)個(gè)體有（填“有”或“沒有”）相同的遺傳物質(zhì)．

19．人的血清白蛋白（HSA）在臨床上需求量很大，通常從人血中提�。�但由于艾滋病病毒（HIV）等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增，使人們對(duì)血 液制品顧慮重重．如果應(yīng)用基因工程和克隆技術(shù)，將人的血清白蛋白基因轉(zhuǎn)入奶牛細(xì)胞中，那么利用牛的乳汁生產(chǎn)血清白蛋白就成為可能．其大致過(guò)程如下：
Ⅰ．采集良種供體奶牛的卵母細(xì)胞和精液，通過(guò)體外受精，形成奶牛受精卵；
Ⅱ．將人血清白蛋白基因?qū)�入奶牛受精卵，形成重組細(xì)胞；
Ⅲ．電脈沖刺激重組細(xì)胞促使其形成早期胚胎；
Ⅳ．將胚胎移植到受體母牛的子宮中，最終發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小牛．
請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）步驟Ⅰ中，在體外受精前，需要對(duì)奶牛的精子進(jìn)行獲能處理．受精時(shí)，往往一個(gè)卵母細(xì)胞只能和一個(gè)精子結(jié)合，受精過(guò)程中防止多精入卵的生理反應(yīng)包括透明帶反應(yīng)和卵黃膜封閉作用
（2）實(shí)驗(yàn)步驟Ⅲ中，進(jìn)行動(dòng)物早期胚胎的體外培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中除了含有各種無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽類、維生素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分外，還要添加激素和動(dòng)物血清．
（3）實(shí)驗(yàn)步驟Ⅳ中，在胚胎移植前可以取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞 做DNA分析鑒定性別，應(yīng)選擇性別為雌性的奶牛胚胎進(jìn)行移植．
（4）若需迅速得到大量轉(zhuǎn)基因奶牛，現(xiàn)有兩種處理方法：
方法A：在步驟Ⅳ中將早期胚胎分離成若干個(gè)胚胎細(xì)胞，讓其分別發(fā)育成一頭小牛．進(jìn)行上述操作時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚進(jìn)行操作．
方法B：在步驟Ⅳ中將早期胚胎細(xì)胞的細(xì)胞核移植到普通黃牛的去核卵細(xì)胞細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成新胚胎．為獲得大量可供移植的胚胎細(xì)胞核，可將早期胚胎細(xì)胞分離出來(lái)，在添加抑制因子培養(yǎng)液中，將其培養(yǎng)成能夠增殖而不發(fā)生分化的胚胎干細(xì)胞，再?gòu)脑摷?xì)胞中提取所需的細(xì)胞核．上述兩種方法中，最能保持步驟Ⅳ中早期胚胎細(xì)胞遺傳特征的是方法A．

18．利用轉(zhuǎn)基因奶牛乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的生長(zhǎng)激素，需要構(gòu)建一種能高水平表達(dá)的基因表達(dá)載體，選擇合適的基因啟動(dòng)子至關(guān)重要．由于無(wú)法由基因表達(dá)產(chǎn)物推知啟動(dòng)子的堿基序列，運(yùn)用PCR技術(shù)單獨(dú)克隆啟動(dòng)子存在困難．科研人員經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期研究，終于發(fā)明了如圖所示的一種克隆啟動(dòng)子的方法．請(qǐng)分析回答：

（1）培育轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí)，需要在生長(zhǎng)激素基因編碼序列前插入乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子；構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入動(dòng)物受精卵常用顯微注射技術(shù)．
（2）由基因表達(dá)產(chǎn)物無(wú)法推知啟動(dòng)子堿基序列，其原因是基因中啟動(dòng)子的堿基序列不能被轉(zhuǎn)錄．
（3）過(guò)程①需選擇的限制酶是BamHⅠ，過(guò)程③需選擇的限制酶是HindⅢ．過(guò)程④需要使用的工具酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
（4）過(guò)程④中可以根據(jù)編碼序列兩端的部分堿基序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增．運(yùn)用PCR擴(kuò)增DNA片段的原理是DNA雙鏈復(fù)制．

17．基因工程又叫做基因拼接技術(shù)．該技術(shù)能夠通過(guò)對(duì)生物的基因進(jìn)行改造和重新組合，產(chǎn)生出人類所需要的基因產(chǎn)物．自20世紀(jì)70年代基因工程發(fā)展起來(lái)以后，人們開始采用高新技術(shù)生產(chǎn)各種基因產(chǎn)品．下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1和圖2示基因工程部分操作過(guò)程：

限制酶	BamHⅠ	HindⅢ	EcoRⅠ	SmaⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)	G↓GATCC CCTAG↑G	A↓AGCTT TTCGA↑A	G↓AATTC CTTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

（1）從表中四種酶的酶切割位點(diǎn)看，可以切出平末端的酶是SmaⅠ．
（2）將目的基因與質(zhì)粒DNA縫合時(shí)，兩條鏈上的磷酸、脫氧核糖在DNA連接酶的作用下連接起來(lái)，形成磷酸二酯鍵；兩條鏈間的堿基對(duì)通過(guò)氫鍵連接起來(lái)．
（3）圖2中的質(zhì)粒分子可被表中EcoRⅠ酶切割，切割后，質(zhì)粒含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)．
（4）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高．
（5）在相關(guān)酶的作用下，甲與乙能否拼接起來(lái)？并說(shuō)明理由．能，二者具有相同的黏性末端．