Question

如1圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過程，圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、Bau3AⅠ、BstⅠ、HaeⅢ、NotⅠ所指位點(diǎn)為限制酶的酶切位點(diǎn)，五種酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)在表中．據(jù)圖回答：

限制酶	BamHⅠ	HaeⅢ	BstⅠ	Bau3AⅠ	NotⅠ
識(shí)別序列及切割位點(diǎn)

（1）將雙鏈DNA在中性鹽溶液中加熱，兩條單鏈分開，叫做DNA變性．變性后的DNA如果慢慢冷卻，又能恢復(fù)為雙鏈DNA，叫做退火．大量的如圖2中N元素標(biāo)記的DNA在變性后的退火過程中會(huì)形成

 

種DNA．
（2）若對(duì)圖1中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的Not I酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越

 

．
（3）要將人乳蛋白基因插入載體，如果只允許用一種限制酶酶切載體和人乳鐵蛋白基因，應(yīng)選擇的限制酶是

 

．
（4）篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含

 

的培養(yǎng)基上進(jìn)行．
（5）若從細(xì)胞中提取DNA和RNA，通過基因工程的方法，轉(zhuǎn)移到另一種細(xì)胞時(shí)，轉(zhuǎn)入DNA比轉(zhuǎn)入RNA要有優(yōu)勢(shì)，理由是

 

．
（6）在胚胎移植過程中，供、受體牛選擇好后，要用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理的原因是

 

，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育．
（7）為檢測(cè)人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用

 

技術(shù)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過程，該過程采用了基因工程技術(shù)（①目的基因的獲取、②基因表達(dá)載體的構(gòu)建、③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)）、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)．

解答： 解：（1）根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，圖2中N元素標(biāo)記的DNA在變性后的退火過程中只能形成1種DNA．
（2）堿基之間的配對(duì)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，即C-G，A-T，且C和G之間有3個(gè)氫鍵，A和T之間有2個(gè)氫鍵，因此C和G的含量越高，DNA分子熱穩(wěn)定性也越高．Not I酶切位點(diǎn)中均為C-G堿基對(duì)，因此插入的Not I酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒中的C和G的含量就越高，其熱穩(wěn)定性也越高．
（3）根據(jù)表中五種酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)可知，限制酶Bau3AI還可以切割限制酶BstⅠ和限制酶BamHⅠ的識(shí)別序列，因此要將人乳蛋白基因插入載體，在只允許用一種限制酶酶切載體和人乳鐵蛋白基因的情況下，應(yīng)選擇限制酶Bau3AI．
（4）用限制酶Bau3AI切割后會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因，但不會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，因此倒入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞可能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存下來．
（5）轉(zhuǎn)入DNA不僅能合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，而且能夠復(fù)制并傳給下一代，因此轉(zhuǎn)移到另一種細(xì)胞時(shí)，轉(zhuǎn)入DNA比轉(zhuǎn)入RNA要有優(yōu)勢(shì)．
（6）在胚胎移植過程中，要用促性腺激素對(duì)供受體進(jìn)行同期發(fā)情處理，是供體和受體有相同的生理環(huán)境，以保證移植的胚胎能夠繼續(xù)正常發(fā)育．
（7）為檢測(cè)牛基因組中是否含有人乳鐵蛋白基因可采用DNA分子雜交技術(shù)，而檢測(cè)目的基因是否表達(dá)可采用抗原-抗體雜交的方法．
故答案為：
（1）1   
（2）高
（3）Bau3A I    
（4）氨芐青霉素
（5）轉(zhuǎn)入DNA不僅能合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，而且能夠復(fù)制并傳給下一代
（6）使供體和受體有相同的生理環(huán)境
（7）抗原-抗體雜交

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖表，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及其特點(diǎn)；識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握其應(yīng)用，能根據(jù)圖中和表中信息選擇合適的限制酶，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．