Question

如圖為轉(zhuǎn)基因煙草培育過程流程圖，請回答：
（l）攜帶外源基因的質(zhì)粒除了含有外源基因外，還包括

 

、

 

、復制原點和標記基因中標記基因的作用是

 

，構(gòu)建攜帶外源基因的質(zhì)粒時，需要使用的工具酶是

 

．
（2）圖中目的基因?qū)�人煙草細胞的方法�?div id="kcyiuwm" class='quizPutTag' contenteditable='true'> 

，感染過程是利用農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上的

 

，使外源基因進入并整合到煙草染色體DNA上．此外另一十分簡便經(jīng)濟的導人方法是

 

．
（3）將含有目的基因的受體細胞培養(yǎng)成煙草植株的技術(shù)叫做

 

，其理論基礎是

 

，圖中的生根、長芽過程屬于

 

過程．
（4）在培養(yǎng)過程中，除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)，還需要向培養(yǎng)基中添加

 

，同時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),植物組織培養(yǎng)的概念及原理

專題：

分析：基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（l）基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，其中標記基因的作用是鑒別受體細胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來；構(gòu)建基因表達載體時，首先需用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，其次還需用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組DNA分子．
（2）由圖可知，將目的基因?qū)�入受體細胞的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其原理是：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細胞中染色體的DNA上．將目的基因?qū)�入植物細胞的另一十分簡便�?jīng)濟的導人方法是花粉管通道法．
（3）將轉(zhuǎn)基因細胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其理論基礎是植物細胞具有全能性．植物組織培養(yǎng)包括脫分化和再分化兩個重要的步驟，圖中的生根、長芽過程屬于再分化過程．
（4）決定脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是植物激素的種類及比例，因此在培養(yǎng)過程中，除添加必要的營養(yǎng)物質(zhì)，還需要向培養(yǎng)基中添加植物激素；植物組織培養(yǎng)時除提供適宜的溫度、光照和氧氣等環(huán)境條件外，成功的另一關(guān)鍵是無菌操作．
故答案為：
（1）啟動子     終止子    鑒別受體細胞中國是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來     限制酶和DNA連接酶
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法     T-DNA    花粉管通道法
（3）植物組織培養(yǎng)      植物細胞具有全能性     再分化
（4）植物激素     無菌操作

點評：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因煙草的培育過程圖解，考查基因工程和細胞工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細節(jié)；識記植物組織培養(yǎng)的過程、條件及原理等基礎知識，能結(jié)合所學的知識準確答題．