Question

基因工程又叫基因拼接技術(shù)．
（1）在該技術(shù)中，切割DNA的工具是限制酶，它能識(shí)別某一特定核苷酸序列，使兩個(gè)核苷酸之間的

 

斷開(kāi)．限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端有兩種形式，分別是

 

、

 

．
（2）基因工程中常用“分子縫合針”是連接酶，根據(jù)酶的來(lái)源不同可分為

 

、

 

 兩類，其中前者只可以連接

 

，后者既可以連接

 

也可以連接

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，因此一種限制酶只能識(shí)別特定的堿基序列和切割一定的位點(diǎn)．
2、DNA連接酶根據(jù)酶的來(lái)源不同分為兩類：E?coli連接酶、T₄DNA連接酶．這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低．DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．

解答： 解：（1）在該技術(shù)中，切割DNA的工具是限制酶，它能識(shí)別某一特定核苷酸序列，使兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)．限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端有兩種形式，分別是黏性末端、平末端．
（2）基因工程中常用“分子縫合針”是連接酶，根據(jù)酶的來(lái)源不同可分為E?coli連接酶、T₄DNA連接酶兩類，其中前者只可以連接黏性末端，后者既可以連接黏性末端，也可以連接平末端．
故答案為：
（1）磷酸二酯鍵         黏性末端           平末端
（2）E?coli連接酶      T₄DNA連接酶       黏性末端       黏性末端      平末端

點(diǎn)評(píng)：本題主要考查學(xué)生對(duì)基礎(chǔ)知識(shí)的記憶和理解能力．題目中考查的主要是基因工程的兩種工具酶．基因工程是考查的重點(diǎn)知識(shí)，與細(xì)胞工程、胚胎工程等現(xiàn)代生物技術(shù)都有一定聯(lián)系．復(fù)習(xí)時(shí)可以建立知識(shí)框架，幫助記憶和理解．要注意，獲取目的基因和切割載體時(shí)使用同種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端．獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生 4個(gè)黏性末端或平末端．限制酶切割位點(diǎn)的選擇必須保證標(biāo)記基因的完整性，以便于檢測(cè)．