Question

10．下面是通過基因工程獲得內皮紊的主要受體ET_A的過程，圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶Apa I的識別序列為，限制酶Xho I的識別序列為．請分析回答下列問題：

（1）圖中cDNA文庫小于（填“大于”“等于”或“小于”）基因組文庫，若要在短時間內獲得大量的目的基因片段，可采用PCR技術進行擴增，擴增過程需使用熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（2）過程③中，限制酶Xho I切割DNA，形成的目的基因的黏性末端是-AGCT（或）．用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是使目的基因定向連接到載體上（或防止自身環(huán)化）．
（3）過程④中需要用DNA連接酶將目的基因與載體組合在一起；過程⑥中，要用Ca²⁺預先處理大腸桿菌，使其處于容易吸收外界DNA的感受態(tài)．利用SNAP基因與ET_A基因結合構成融合基因，目的是有利于檢測內皮素受體ET_A基因能否表達及表達量．

Answer 1

分析 根據(jù)題意和圖示分析可知：①②③表示反轉錄法獲得目的基因的過程，④表示構建基因表達載體，⑤表示限制酶切割質粒，⑥表示重組質粒導入受體細胞，⑦表示目的基因的檢測．

解答 解：（1）基因組文庫包括了該種生物所有的基因，而部分基因文庫只包含一種生物的部分基因，因此cDNA文庫小于基因組文庫．若要在短時間內獲得大量的目的基因片段，可采用PCR技術進行擴增，擴增過程需使用熱穩(wěn)定DNA聚合酶．
（2）過程③和⑤利用限制酶XhoⅠ切割DNA獲得目的基因的過程，限制酶使得DNA的磷酸二酯鍵斷開，形成的黏性末端是．用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是使目的基因定向連接到載體上（或防止自身環(huán)化）．
（3）過程④中需要用DNA連接酶將目的基因與載體組合在一起；過程⑥中，要用Ca²⁺預先處理大腸桿菌，使其處于容易吸收外界DNA的感受態(tài)．利用SNAP基因與ET_A基因結合構成融合基因，目的是有利于檢測內皮素受體ET_A基因能否表達及表達量．
故答案為：
（1）小于     PCR     熱穩(wěn)定DNA聚合
（2）-AGCT（或）    使目的基因定向連接到載體上（或防止自身環(huán)化）
（3）DNA連接酶      Ca²⁺       內皮素受體ET_A基因能否表達及表達量

點評 本題考查基因工程的相關知識，意在考查學生的識圖能力和判斷能力，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，能結合圖中信息并運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力．