Question

（16分）斑馬魚(yú)的酶D由17號(hào)染色體上的D基因編碼。具有純合突變基因（dd）的斑馬魚(yú)胚胎會(huì)發(fā)出紅色熒光。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將綠色熒光蛋白（G）基因整合到斑馬魚(yú)17號(hào)染色體上，帶有G基因的胚胎能夠發(fā)出綠色熒光。未整合G基因的染色體的對(duì)應(yīng)位點(diǎn)表示為g。用個(gè)體M和N進(jìn)行如下雜交實(shí)驗(yàn)。

（1）在上述轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中，將G基因與質(zhì)粒重組，需要的兩類(lèi)酶是____________和____________ 。將重組質(zhì)粒用____________方法導(dǎo)入到斑馬魚(yú)受精卵中，整合到染色體上的G基因____________后，使胚胎發(fā)出綠色熒光。
（2）根據(jù)上述雜交實(shí)驗(yàn)推測(cè)：
①親代M的基因型是（  ） （選填選項(xiàng)前的符號(hào)）。
a. DDgg                      b. Ddgg
②子代中只發(fā)出綠色熒光的胚胎基因型包括（ ） （選填選項(xiàng)前的符號(hào)）。
a. DDGG           b. DDGg            c. DdGG            d. DdGg
（3）雜交后，出現(xiàn)紅·綠熒光（既有紅色又有綠色熒光）胚胎的原因是親代（填“M”或“N”）的初級(jí)精（卵）母細(xì)胞在減數(shù)分裂過(guò)程中，同源染色體的_______發(fā)生了交換，導(dǎo)致染色體上的基因重組。

Answer 1

（1）限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接酶顯微注射法表達(dá)
（2）1 b  2 b d
（3）N 非姐妹染色單體

解析試題分析
（1）本題考查轉(zhuǎn)基因內(nèi)容，和遺傳的基本規(guī)律，包括連鎖互換。由題目可知，轉(zhuǎn)基因的過(guò)程是用到同一種限制性核酸內(nèi)切酶去切割目的基因和載體，再DNA連接酶，構(gòu)建基因表達(dá)載體，將重組質(zhì)粒用顯微注射法導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞受精卵，整合后的G如果得到表達(dá)，胚胎會(huì)發(fā)出綠色熒光。
（2）雜交試驗(yàn)是應(yīng)用孟德?tīng)柕倪z傳規(guī)律
十七號(hào)染色體上存在等位基因D,d
有純合基因dd存在的時(shí)候，胚胎紅色熒光，D-無(wú)紅色熒光。
轉(zhuǎn)基因G-表達(dá)綠色熒光和D在同一條染色體上連鎖,沒(méi)有綠色熒光的基因型是gg
親代：      M                 N
胚胎無(wú)熒光     胚胎綠色熒光
D-gg        x   D-G-
↓
子代：綠色熒光 紅色熒光  無(wú)熒光  紅，綠熒光
D_G_        ddgg       D_gg     ddG_
根據(jù)基因分離和基因自由組合同時(shí)發(fā)生，不成對(duì)的基因具有互不干擾的特點(diǎn)
子代出現(xiàn)dd 推知親本雜交方式是 Dd x Dd
子代出現(xiàn)gg 推知親本雜交方式是gg x Gg
可知：親代M的基因型是Ddgg      N的基因型是DdGg
子代只發(fā)出綠色熒光的胚胎基因型包括：DDGg， DdGg
（3）由于題目中交代D，G在基因分離時(shí)候會(huì)出現(xiàn)連鎖現(xiàn)象，親本N只能產(chǎn)生兩種配子DG和dg，與M雜交時(shí)候是不會(huì)出現(xiàn)紅綠熒光（ddG_）這樣的表現(xiàn)型，若出現(xiàn)，則說(shuō)明N產(chǎn)生了Dg的配子，這屬于基因重組，發(fā)生在同源染色體非姐妹染色單體的交叉互換。
考點(diǎn)：本題考查基因工程的過(guò)程，孟德?tīng)栠z傳基本規(guī)律中的分離，自由組合和連鎖互換，掌握各知識(shí)點(diǎn)之間的內(nèi)在聯(lián)系。