Question

Ⅰ．農(nóng)作物秸稈在生產(chǎn)實(shí)踐中具有多種用途．在特定微生物產(chǎn)生的纖維素酶的催化下，秸稈中的纖維素可被分解為葡萄糖，經(jīng)發(fā)酵后形成乙醇，再加工即可制成燃料乙醇，減少了人類生活對石油資源的依賴．請分析回答：
（1）欲從土壤中分離獲取上述特定微生物，可采用

 

或

 

法進(jìn)行接種，所用培養(yǎng)基以纖維素為唯一碳源，目的是只允許能產(chǎn)生

 

的微生物生長，而其他微生物均不能生長．在培養(yǎng)基中加入適量的剛果紅染料，若觀察到

 

即可初步篩選到目的菌．
（2）某研究人員經(jīng)上述培養(yǎng)獲得了三種微生物（甲、乙、丙），現(xiàn)通過如下實(shí)驗(yàn)比較三種微生物所產(chǎn)生纖維素酶的活性大�。�
①將甲、乙、丙三種微生物經(jīng)離心等方法處理后，制成酶濃度相同的纖維素酶提取液，取等體積的三種提取液分別與等量的纖維素懸浮液混合，在相同且適宜的pH和溫度條件下放置一段時間．
②利用

 

試劑檢測產(chǎn)物中的葡萄糖，并通過比較顏色深淺程度判斷酶活性的大�。�
③實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

	甲提取液	乙提取液	丙提取液
顏色深淺程度	+	+++	++

注：“+”越多，顏色越深
由表分析，三種微生物產(chǎn)生的纖維素酶活性不同，最可能的原因是

 

．其中產(chǎn)生酶活性最強(qiáng)的微生物是

 

．
Ⅱ．有機(jī)磷化合物在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中作為殺蟲劑被廣泛使用，長期以來因其使用量大、范圍廣，造成了水體污染等諸多環(huán)境問題．
（1）為了篩選甲胺磷（分子式如圖）的降解細(xì)菌，將農(nóng)藥廠的甲胺磷污染土壤懸液涂布在

 

固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，可以對降解菌進(jìn)行定向的

 

．
（2）在分離得到的菌株A中檢測到了ophc2蛋白，可以催化甲胺磷的降解，這種蛋白質(zhì)是在細(xì)胞的

 

上合成的．若要定量分析ophc2蛋白的催化能力，應(yīng)測定單位時間內(nèi)

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：（1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落；剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理：剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物．當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．
（2）讓土壤中的微生物將淀粉水解后，產(chǎn)物是麥芽糖、葡萄糖等還原糖，加入斐林試劑以后，還原糖在加熱的條件下，能夠?qū)㈧沉衷噭┻�原成磚紅色，顏色越深說明生成的氧化亞銅越多，代表還原糖就越多．

解答： 解：Ⅰ（1）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；剛果紅可以和纖維結(jié)合形成紅色復(fù)合物，纖維素分解菌將纖維素分解以后，紅色復(fù)合物消失，會形成透明圈．
（2）②檢測還原糖用的試劑是斐林試劑，顏色越深說明還原糖越多．
③三種微生物產(chǎn)生的纖維素酶活性不同，取決于蛋白質(zhì)的不同，影響蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)不同的原因是氨基酸的排列順序或蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)不同．
Ⅱ（1）為了篩選甲胺磷的降解細(xì)菌，需在以甲胺磷為唯一碳源固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，這樣可以對降解菌進(jìn)行定向的選擇． 
（2）蛋白質(zhì)的合成場所是核糖體，要定量分析ophc2蛋白的催化能力，應(yīng)測定單位時間內(nèi)甲胺磷的降解量．
故答案為：Ⅰ（1）稀釋涂布平板    平板劃線   纖維素酶    菌落周圍出現(xiàn)透明圈
（2）②斐林
③不同酶的氨基酸序列不同    乙
Ⅱ（1）以甲胺磷為唯一碳源    選擇
（2）核糖體   甲胺磷的降解量

點(diǎn)評：纖維素被纖維素分解菌分解以后產(chǎn)生還原糖，還原糖的鑒定可以用斐林試劑去鑒定，選修知識點(diǎn)在高考的考綱中的要求是可以和必修知識點(diǎn)聯(lián)系的，而還原糖的鑒定就屬于必修知識點(diǎn)，在復(fù)習(xí)中要加強(qiáng)選修與必修的聯(lián)系．