Question

下面是一項“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要，請回答：

本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計所含的密碼子，通過某方法合成若干DNA片段，拼接而成，重組DNA分子可通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)入番茄中，在番茄的果實中表達(dá)人胰島素。

（1）本專利是采用___________方法獲得目的基因。獲得的人胰島素基因與人體細(xì)胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，原因是________________。要想在體外獲得大量該目的基因的片段，可以采用__________技術(shù)。該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是____________ ；原料是四種脫氧核苷酸。

（2）根據(jù)上述摘要，轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是___________，載體上的________可以轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上。

（3）如果要檢測在受體細(xì)胞中是否存在目的基因可采用____________技術(shù),再經(jīng) 方法培養(yǎng)成個體。

 

Answer 1

（1）人工合成 密碼子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同 PCR 熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（或Taq酶） （2）農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒 T–DNA （3）DNA分子雜交 組織培養(yǎng)

【解析】

試題分析：⑴由題意可知，所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設(shè)計所含的密碼子，通過人工合成若干DNA片段拼接而成，所以本專利是采用人工合成方法獲得目的基因的。獲得的人胰島素基因與人體細(xì)胞中胰島素基因的堿基序列不同，但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同，原因是密碼子具有簡并性，基因序列不同，蛋白質(zhì)可以相同；體外擴(kuò)增目的基因采用的技術(shù)是PCR，使用的酶是耐高溫的DNA聚合酶。⑵利用農(nóng)桿菌作為運載體時，需要將基因表達(dá)載體插入到農(nóng)桿菌的T—DNA，因為其具有可以轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上的特點。⑶檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是DNA分子雜交；含有目的基因的受體細(xì)胞經(jīng)過植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因個體。

考點：本題主要考查基因工程，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。