將細(xì)菌A接種于固體培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落，用一定劑量的紫外線處理A，得到突變種a₁，并接種于培養(yǎng)中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲后，出現(xiàn)菌落；用另一劑量的紫外線處理A，得到突變種a₂接種于培養(yǎng)基中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙后，出現(xiàn)菌落；若將a₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，數(shù)日后出現(xiàn)菌落。下列說法正確的是   （    ）

       A．細(xì)菌a₁和a₂分別培養(yǎng)，均不能生長(zhǎng)是因?yàn)樽贤饩�處理導(dǎo)致細(xì)菌A發(fā)生了基因突變，從而無法合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲或乙

       B．物質(zhì)甲和乙均是細(xì)菌A在代謝過程中產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物

       C．在實(shí)驗(yàn)中添加的物質(zhì)甲或乙是作為生長(zhǎng)因子添加到培養(yǎng)基中的

D．a(chǎn)₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落是因?yàn)榧?xì)菌a₁能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，細(xì)菌a₂能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲

將細(xì)菌A接種于固體培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落，用一定劑量的紫外線處理A，得到突變種a₁，并接種于培養(yǎng)中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲后，出現(xiàn)菌落；用另一劑量的紫外線處理A，得到突變種a₂接種于培養(yǎng)基中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙后，出現(xiàn)菌落；若將a₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，數(shù)日后出現(xiàn)菌落。下列說法正確的是

1. A.
   細(xì)菌a₁和a₂分別培養(yǎng)，均不能生長(zhǎng)是因?yàn)樽贤饩�處理導(dǎo)致細(xì)菌A發(fā)生了基因突變，從而無法合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲或乙
2. B.
   物質(zhì)甲和乙均是細(xì)菌A在代謝過程中產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物
3. C.
   在實(shí)驗(yàn)中添加的物質(zhì)甲或乙是作為生長(zhǎng)因子添加到培養(yǎng)基中的
4. D.
   a₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落是因?yàn)榧?xì)菌a₁能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，細(xì)菌a₂能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲

將細(xì)菌A接種于固體培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落，用一定劑量的紫外線處理A，得到突變種a₁，并接種于培養(yǎng)中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲后，出現(xiàn)菌落；用另一劑量的紫外線處理A，得到突變種a₂接種于培養(yǎng)基中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙后，出現(xiàn)菌落；若將a₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，數(shù)日后出現(xiàn)菌落。下列說法正確的是   （    ）

       A．細(xì)菌a₁和a₂分別培養(yǎng)，均不能生長(zhǎng)是因?yàn)樽贤饩�處理導(dǎo)致細(xì)菌A發(fā)生了基因突變，從而無法合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲或乙

       B．物質(zhì)甲和乙均是細(xì)菌A在代謝過程中產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物

       C．在實(shí)驗(yàn)中添加的物質(zhì)甲或乙是作為生長(zhǎng)因子添加到培養(yǎng)基中的

D．a(chǎn)₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落是因?yàn)榧?xì)菌a₁能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，細(xì)菌a₂能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲

將細(xì)菌A接種于固體培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落，用一定劑量的紫外線處理A，得到突變種a₁，并接種于培養(yǎng)中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲后，出現(xiàn)菌落；用另一劑量的紫外線處理A，得到突變種a₂接種于培養(yǎng)基中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙后，出現(xiàn)菌落；若將a₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，數(shù)日后出現(xiàn)菌落。下列說法正確的是

A．細(xì)菌a₁和a₂分別培養(yǎng)，均不能生長(zhǎng)是因?yàn)樽贤饩�處理導(dǎo)致細(xì)菌A發(fā)生了基因突變，從而無法合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲或乙

B．物質(zhì)甲和乙均是細(xì)菌A在代謝過程中產(chǎn)生的次級(jí)代謝產(chǎn)物

C．在實(shí)驗(yàn)中添加的物質(zhì)甲或乙是作為生長(zhǎng)因子添加到培養(yǎng)基中的

D．a(chǎn)₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落是因?yàn)榧?xì)菌a₁能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙，細(xì)菌a₂能合成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲

將細(xì)菌A接種于固體培養(yǎng)基上，出現(xiàn)菌落，用一定劑量的紫外線處理A，得到突變種a₁，并接種于培養(yǎng)中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)甲后，出現(xiàn)菌落；用另一劑量的紫外線處理A，得到突變種a₂接種于培養(yǎng)基中，不出現(xiàn)菌落，但添加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)乙后，出現(xiàn)菌落；若將a₁和a₂一同接種于培養(yǎng)基上，數(shù)日后出現(xiàn)菌落。下列說法正確的是                               （   ）

(11分)“樹橘柚者，食之則甘，嗅之則香”，每年的10月，正是柑橘大量上市的季節(jié)。橘子全身都是寶：不僅果肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，藥用價(jià)值較高，其皮、核、絡(luò)、葉都是“地道藥材”。請(qǐng)回答下列問題。

(1)江南某橘子盛產(chǎn)地想建立一個(gè)大型的果酒、果醋加工廠，需要的發(fā)酵菌種是_________和________。分離純化這兩種微生物的常用方法是：將10³-10⁷倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用______將菌液鋪平。這種接種方法稱為______。

(2) 提取桔皮的胡蘿卜素過程中，萃取加熱時(shí)需安裝冷凝回流裝置，其目的是________________________________________________________________________。

(3)四川一果汁加工廠在制作橘子汁的過程中發(fā)現(xiàn)果汁有些渾濁，為提高出汁率，可加入適量的________________使果汁變得澄清。

(4) 培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基中常用的凝固劑是________________。培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素用量的比值____________(填“高”或“低”)時(shí)，有利于芽的分化。對(duì)培養(yǎng)基徹底滅菌時(shí)，應(yīng)采取的滅菌方法是______________________________________________。

(5)為了檢測(cè)其中某種菌對(duì)于抗生素的敏感性，取該單菌落適當(dāng)稀釋，接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。將分別含有A、B兩種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素A       ；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該病菌對(duì)抗生素B       ；

I.近期，思念、三全、灣仔碼頭等企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品相繼檢出金黃色葡萄球菌超標(biāo)，“細(xì)菌門”事件引起公眾的普遍關(guān)注。請(qǐng)回答下列問題：

(1)某小組欲檢測(cè)果汁類食品中是否含有金黃色葡萄球菌。經(jīng)查資料：葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。請(qǐng)完成下列實(shí)驗(yàn)

步驟：

①配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)___________，分裝到錐形瓶后___________，在無菌狀態(tài)下加入卵黃液（100 mL10%滅菌NaCl溶液中加一個(gè)雞蛋黃，振蕩均勻）搖勻，立即倒平板。

②接種：取待檢果汁2.5mL加入到22.5 mL的滅菌生理鹽水中，制成接種樣液。

實(shí)驗(yàn)組：將接種樣液用___________法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。

對(duì)照組：將________用同樣的方法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作空白對(duì)照。

將上述接種后的培養(yǎng)皿同時(shí)放在36 ⁰C的恒溫箱中培養(yǎng)48h

③觀察：觀察培養(yǎng)基表面 _______________________________________________________

(2)葡萄球菌能耐受高濃度的NaCl,所以在配制培養(yǎng)基時(shí)加入高濃度的NaCl可以將它分離出來。此培養(yǎng)基屬于___________ 培養(yǎng)基。

(3)要統(tǒng)計(jì)每克果汁樣品中活菌數(shù)目，宜采用___________法接種，根據(jù)果汁樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的___________就能大約推測(cè)出樣品中活菌數(shù)。

Ⅱ．某同學(xué)在做微生物實(shí)驗(yàn)時(shí)，不小心把圓褐固氮菌樣品和酵母菌樣品混在一起，已知青霉素會(huì)影響固氮菌的生長(zhǎng)繁殖，但不影響真菌生長(zhǎng)繁殖。請(qǐng)?zhí)羁胀瓿煞蛛x這兩種菌的主要實(shí)驗(yàn)步驟：

(1)分別配置_____________的培養(yǎng)基和__________的培養(yǎng)基，分別分成兩份，依次標(biāo)上A、a、B、b備用；

(2)分別向A、B培養(yǎng)基接種___________；

(3)把接種后的培養(yǎng)基放在恒溫箱中3d～4d；

(4)從A、B培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落中挑取生長(zhǎng)良好的菌株，分別接種到__________中；

(5)____________________________________________________________________________。

請(qǐng)回答下列在生物技術(shù)實(shí)踐過程中，對(duì)某些實(shí)驗(yàn)步驟的操作中的相關(guān)問題：

(1)在腐乳的制作時(shí)，用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用????????? 消毒；在提取植物細(xì)胞的DNA時(shí)，需要先用洗滌劑溶解???????? 。

(2)葡萄皮、籽中含有原花青素、葡萄皮紅素和大量葡萄風(fēng)味物質(zhì)等，這些物質(zhì)易溶于乙醇、乙酸乙酯中，因此常采用______法來分離提取，還可以用???????????? 和?????????? 等提取植物芳香油的方法。

(3)為了檢測(cè)某致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，取該單菌落適當(dāng)稀釋，接種于固體培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。將分別含有A，B，C三種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素A_______（填“敏感”或“不敏感”）；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素B_____（填“敏感”或“不敏感”）；含C濾紙片周圍的透明圈比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是____________________________。

(4)用來判斷某選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇分解纖維素的細(xì)菌作用，要設(shè)置的對(duì)照是（?? ）

A．未接種的選擇培養(yǎng)基

B．未接種的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

C．接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基

D．接種了的選擇培養(yǎng)基

（15分）纖維素酶對(duì)于能否實(shí)現(xiàn)乙醇工業(yè)化生產(chǎn)、處理服裝面料等具有重要的意義，研究者初步篩選到能合成纖維素酶的菌株MC-1，以下是該菌株的鑒定過程。

（1）為了獲得能合成纖維素酶的單菌落，可采用           法將初篩菌液接種在固體培養(yǎng)基上，這種培養(yǎng)基屬于       培養(yǎng)基。

（2）關(guān)于制備固體培養(yǎng)基的敘述，錯(cuò)誤的是             

A．制作固體培養(yǎng)基時(shí)可以加入瓊脂。

B．操作的順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌。

C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時(shí)進(jìn)行倒平板。

D．待平板冷卻凝固約5-10min后將平板倒過來放置。

（3）實(shí)驗(yàn)過程中如何防止其他微生物的污染？                         。

5）分離獲得了具有較高纖維素酶活性的菌株MC-1，為了在此基礎(chǔ)上獲得纖維素酶活性更高的菌株，最可行的做法是                                。

（6）某同學(xué)在培養(yǎng)過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上感染了幾種細(xì)菌。若在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入________指示劑培養(yǎng)幾種菌后，指示劑變紅就可以鑒定其中含有能夠分解尿素的菌；若在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入________染料，培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈，就可以鑒定其中含有纖維素分解菌。

27. （16分）臨床試用抗生素前，有時(shí)需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對(duì)不同抗生素的敏感性�；卮鹣铝袉栴}：

（1）為了從樣本中獲取致病菌菌落，可用______   _法或_______  __法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。

（2）取該單菌落，用______   法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長(zhǎng)，布滿平板。

（3）為了檢測(cè)該致病菌對(duì)于抗生素的敏感性，將分別含有A，B，C，D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時(shí)間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素A_______；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對(duì)抗生素B_____；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明____               ____；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個(gè)菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。

（4）根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選擇抗生素_______。