綠色熒光蛋白(GFP)是由GFP基因表達(dá)的一種能在紫外線照射下發(fā)出綠色熒光的蛋白質(zhì)，它首先在水母中發(fā)現(xiàn)。如圖為培育綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因豬的流程圖，此豬的獲得，運(yùn)用了哪些技術(shù)

①轉(zhuǎn)基因技術(shù)②核移植技術(shù)③早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)④胚胎移植技術(shù)等⑤顯微注射技術(shù)⑥胚胎分割技術(shù)

A．①②③④⑥   B．①②④⑤⑥   C．①②③④⑤   D．①②③④⑤⑥

綠色熒光蛋白GFP能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）若限制酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，限制酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—，在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點(diǎn)，在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來__________，理由是： ___________________________________________。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多的方法是______________________。

（3）獲得轉(zhuǎn)基因豬的關(guān)鍵步驟是_____（填序號），GFP基因的作用是作為_______。抑制小豬抗原表達(dá)的基因要插入到啟動子和_________之間。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免     _____________________。

（4）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：_____________________（用數(shù)字表示）。

①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）  

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

綠色熒光蛋白（簡稱GFP）含有1條多肽鏈，由238個氨基酸組成，能發(fā)出綠色熒光。下列有關(guān)GFP的敘述不正確的是（　�。�

A．在控制GFP合成的基因中，脫氧核苷酸的數(shù)量應(yīng)該大于1428個

B．GFP在核糖體上形成，含有238個肽鍵

C．若GFP基因隨機(jī)插入一段DNA序列，則可能不能產(chǎn)生正常的GFP

D．轉(zhuǎn)入GFP基因的植物細(xì)胞能發(fā)出熒光說明該基因在植物細(xì)胞中成功表達(dá)

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細(xì)胞和鲴織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記。請根據(jù)圖表回答下列問題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA—，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用的限制酶是__________。③過程需要的酶是__________。

（2）④過程將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞常用的方法是__________。

（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可采用__________技術(shù)進(jìn)行檢測。

（4）用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細(xì)胞的卵黃膜和透明帶之間有__________個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________。

（5）由⑦過程獲得的重組細(xì)胞培育成綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬，涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段有__________。

（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對⑧過程得到的囊胚階段胚胎進(jìn)行分割，要注意__________。得到綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性）之后，可用__________處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力。

綠色熒光蛋白（簡稱GFP）含有1條多肽鏈，由238個氨基酸組成，能發(fā)出綠色熒光。下列有關(guān)GFP的敘述不正確的是

1. A.
   在控制GFP合成的基因中，脫氧核苷酸的數(shù)量應(yīng)該大于1428個
2. B.
   合成GFP的轉(zhuǎn)錄過程需要RNA聚合酶和游離的脫氧核苷酸等參與
3. C.
   將GFP整合到胚胎干細(xì)胞中，可用于胚胎發(fā)育中細(xì)胞的標(biāo)記定位
4. D.
   轉(zhuǎn)入GFP基因的植物細(xì)胞能發(fā)出熒光說明該基因在植物中成功表達(dá)

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記。請根據(jù)圖表回答下列問題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA一，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA—，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用的限制酶是______。③過程需要的酶是____________。

（2）④過程將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞常用的方法是____________。

（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可采用____________ 技術(shù)進(jìn)行檢測。

（4）用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細(xì)胞的卵黃膜和透明帶之間有______個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________________。

（5）由⑦過程獲得的重組細(xì)胞培育成綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬，涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段有__________________。

（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對⑧過程得到的囊胚階段胚胎進(jìn)行分割，要注意________________________。得到綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性）之后，可用__________________處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力。

15．綠色熒光蛋白（簡稱GFP）含有1條多肽鏈，由238個氨基酸組成，能發(fā)出綠色熒光。下列有關(guān)GFP的敘述不正確的是（　　）

A．在控制GFP合成的基因中，脫氧核苷酸的數(shù)量應(yīng)該大于1428個

B．GFP在核糖體上形成，含有238個肽鍵

C．若GFP基因隨機(jī)插入一段DNA序列，則可能不能產(chǎn)生正常的GFP

D．轉(zhuǎn)入GFP基因的植物細(xì)胞能發(fā)出熒光說明該基因在植物細(xì)胞中成功表達(dá)

綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細(xì)胞和鲴織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記。請根據(jù)圖表回答下列問題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA—，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA—，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用的限制酶是__________。③過程需要的酶是__________。
（2）④過程將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞常用的方法是__________。
（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可采用__________技術(shù)進(jìn)行檢測。
（4）用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細(xì)胞的卵黃膜和透明帶之間有__________個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________。
（5）由⑦過程獲得的重組細(xì)胞培育成綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬，涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段有__________。
（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對⑧過程得到的囊胚階段胚胎進(jìn)行分割，要注意__________。得到綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性）之后，可用__________處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力。

　 綠色熒光蛋白基因（GFP）被發(fā)現(xiàn)以來，一直作為一個監(jiān)測完整細(xì)胞和組織內(nèi)基因表達(dá)及蛋白質(zhì)位置的理想標(biāo)記。請根據(jù)圖表回答下列問題。

（1）若圖中GFP的M端伸出的核苷酸的堿基序列是—TCGA一，N端伸出的核苷酸的堿基序列是—TGCA—，則在構(gòu)建含該GFP的重組質(zhì)粒A時，應(yīng)選用的限制酶是______ 。③過程需要的酶是____________。

（2）④過程將基因表達(dá)載體導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞常用的方法是____________。

（3）檢測GFP是否已重組到豬胎兒成纖維細(xì)胞的染色體DNA上，可采用____________技術(shù)進(jìn)行檢測。

（4）用顯微鏡可觀察到用于⑥過程的豬卵母細(xì)胞的卵黃膜和透明帶之間有______個極體。用于⑤過程的豬胎兒成纖維細(xì)胞，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________________。

（5）由⑦過程獲得的重組細(xì)胞培育成綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬，涉及到的現(xiàn)代生物技術(shù)手段有__________________。

（6）為了加快繁殖速度，可采用胚胎分割的方法。若對⑧過程得到的囊胚階段胚胎進(jìn)行分割，要注意__________________。得到綠色熒光轉(zhuǎn)基因克隆豬（雌性）之后，可用__________________處理，使之超數(shù)排卵，提高其繁育能力。

基因工程相關(guān)。2008年諾貝爾化學(xué)獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

注：圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點(diǎn)。

  （1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來        ，理由是：                                          。

  （2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多的方法是              。

  （3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是               。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是，可以避免           。

  （4）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：          （用數(shù)字表示）。①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。