（多選）在基因工程中，作為基因運輸工具的運載體，必須具備的條件有             （    ）

A．能夠在宿主細胞中復制，并穩(wěn)定地保存    

B．具有多個限制酶切點

C．必須是細菌的質�；蚴删�體              

D．具有某些標記基因

作為基因工程中的運載體應具備的條件不包括（）

1. A.
   能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存
2. B.
   有多個限制酶切點，以便與外源基因連接
3. C.
   都是環(huán)狀雙鏈DNA分子
4. D.
   都有便于篩選的標記基因

作為基因工程中的運載體應具備的條件不包括（　�。�

A．能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存

B．有多個限制酶切點，以便與外源基因連接

C．都是環(huán)狀雙鏈DNA分子

D．都有便于篩選的標記基因

A．能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存

B．有多個限制酶切點，以便與外源基因連接

C．都是環(huán)狀雙鏈DNA分子

D．都有便于篩選的標記基因

ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制，需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下：

第①步：用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。

第③步：將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質粒2。

第④步：將重組質粒2導入藍藻細胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同，所以能準確地與其發(fā)生同源重組，產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據(jù)上述資料，回答下列問題：

（1）第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴增DNA時必須加入引物，引物的實質是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術擴增DNA一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過三個步驟，其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響，應如何設置對照？                       。

（3）構建重組質粒1、2時，為保證成功率，往往使用                        酶

對基因和質粒進行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開。

（4）質粒是基因工程中最常用的運載體，其化學本質是         ，此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。

（5）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用            制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細胞篩選出來。

（10分）ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制，需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下：

第①步：用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。
第②步：將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。
第③步：將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質粒2。
第④步：將重組質粒2導入藍藻細胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同，所以能準確地與其發(fā)生同源重組，產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據(jù)上述資料，回答下列問題：
（1）第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？        。
PCR擴增DNA時必須加入引物，引物的實質是         ，其作用是                               。
（2）利用PCR技術擴增DNA一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過三個步驟，其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是                  。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響，應如何設置對照？                      。
（3）構建重組質粒1、2時，為保證成功率，往往使用                       酶
對基因和質粒進行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的             鍵打開。
（4）質粒是基因工程中最常用的運載體，其化學本質是        ，此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。
（5）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用           制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入             可將變異株細胞篩選出來。

ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制，需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下：

第①步：用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。

第③步：將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質粒2。

第④步：將重組質粒2導入藍藻細胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同，所以能準確地與其發(fā)生同源重組，產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據(jù)上述資料，回答下列問題：

（1）第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？           。

PCR擴增DNA時必須加入引物，其作用是                                         。

（2）利用PCR技術擴增DNA一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過三個步驟，其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是                                          。

（3）構建重組質粒1、2時，為保證成功率，往往使用                                  酶對基 因和質粒進行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的               鍵打開。

（4）質粒是基因工程中最常用的運載體，其化學本質是                      ，此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。

（5）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用                   制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細胞篩選出來。

（10分）ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制，需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下：

第①步：用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。

第③步：將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質粒2。

第④步：將重組質粒2導入藍藻細胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同，所以能準確地與其發(fā)生同源重組，產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據(jù)上述資料，回答下列問題：

（1）第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴增DNA時必須加入引物，引物的實質是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術擴增DNA一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過三個步驟，其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響，應如何設置對照？                       。

（3）構建重組質粒1、2時，為保證成功率，往往使用                        酶

對基因和質粒進行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開。

（4）質粒是基因工程中最常用的運載體，其化學本質是         ，此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。

（5）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用            制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細胞篩選出來。

ch1L基因是藍藻擬核DNA上與葉綠素合成有關的基因。為研究該基因對葉綠素合成的控制，需要構建該種生物缺失ch1L基因的變異株細胞。構建過程如下：

第①步：用PCR技術從藍藻環(huán)狀DNA中擴增出ch1L基因片段。

第②步：將ch1L基因與質粒構建形成重組質粒1。

第③步：將重組質粒1中ch1L基因中部0.8kb片段刪除，用一段紅霉素抗性基因取代之，得到重組質粒2。

第④步：將重組質粒2導入藍藻細胞，由于改造后的基因與ch1L基因仍有很長的序列相同，所以能準確地與其發(fā)生同源重組，產生出缺失ch1L基因的突變株。請根據(jù)上述資料，回答下列問題：

（1）第①步用PCR技術擴增DNA片段時用到的耐高溫的酶通常是指什么酶？         。

PCR擴增DNA時必須加入引物，引物的實質是          ，其作用是                                。

（2）利用PCR技術擴增DNA一般要經(jīng)過三十多次循環(huán)，每次循環(huán)都要經(jīng)過三個步驟，其中“復性”這一步驟發(fā)生的變化是                   。為消除PCR擴增過程當中外源DNA污染造成的影響，應如何設置對照？                       。

（3）構建重組質粒1

2時，為保證成功率，往往使用                       酶

對基因和質粒進行切割，以切出相同的黏性末端，便于連接。此酶的作用是將DNA分子的              鍵打開。

（4）質粒是基因工程中最常用的運載體，其化學本質是         ，此外還可用噬菌體、動植物病毒作用為運載體。

（5）導入重組質粒2以后，往往還需要進行檢測和篩選，可用            制成探針，檢測是否導入了重組基因，在培養(yǎng)基中加入              可將變異株細胞篩選出來。

應用基因工程技術可以獲得人們需要的生物新品種或新產品。請根據(jù)資料和圖解回答下列問題：
材料一：蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強的抗張強度，可制成防彈背心、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱�？茖W家研究出集中生產蜘蛛絲的方法——培育轉基因蜘蛛羊。
材料二：注射疫苗往往會在兒童和部分成年人身上引起痛苦，將疫苗藏身于水果蔬菜中，人們在食用這些轉基因植物的同時也獲得免疫力，因而無需免疫接種，這一新概念將引起疫苗研究的一場革命。

（1）過程①⑤所需要的工具酶有                   ，構建的乙肝表面抗原蛋白基因表達載體一般由                                  等部分組成。
（2）過程②是將重組質粒導入山羊受體細胞，受體細胞應選擇          ，采用最多的也是最有效的導入方法是           ；
過程⑥是將重組質粒導入萵苣受體細胞，受體細胞可為                 ，采用最多的導入方法是                 。
（3）通過①～④過程培育的蜘蛛羊可以作為乳腺生物反應器，從         中提取所需要的蜘蛛絲蛋白。還可以形成膀胱生物反應器，從         中提取所需蛛絲蛋白，簡化提取過程。
資料三：PCR技術（聚合酶鏈式反應）是一項在生物體外復制特定的DNA片段的核酸合成技術，下圖表示合成過程，請據(jù)圖分析回答：

（4）A過程高溫使DNA變性解旋，對該過程的原理敘述正確的是:(    )