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有關(guān)生物技術(shù)的操作過(guò)程或應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（ ）

A.測(cè)定泡菜中亞硝酸鹽含量時(shí)需要標(biāo)準(zhǔn)顯色液

B.可用聚乙二醇促進(jìn)植物細(xì)胞原生質(zhì)體的融合

C.胚胎分割技術(shù)可看做是動(dòng)物無(wú)性繁殖的方法

D.以尿素作為唯一碳源的培養(yǎng)基用于鑒別細(xì)菌

尿素是一種高濃度氮肥且長(zhǎng)期施用沒(méi)有不良影響，但尿素只有通過(guò)土壤中某些細(xì)菌的分解作用，才能被植物吸收利用．某同學(xué)要分離出土壤中能分解尿素的細(xì)菌，并嘗試進(jìn)行計(jì)數(shù)，培養(yǎng)基配方如下：

K2HPO4 NaCl H2O 葡萄糖 尿素 酚紅 瓊脂

0.12g 0.12g 15mL 0.025g 2.0g 0.25mg 0.5g

（1）分解尿素的細(xì)菌都能合成 脲酶 ，該種細(xì)菌在生態(tài)平衡中起到什么作用？ 參與了氮循環(huán)（或維持氮平衡） ．寫(xiě)出細(xì)菌分解尿素的方程式 ．

（2）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌？ 不能 （能/不能），原因是 瓊脂是未被純化的混合物，內(nèi)含一定的含氮化合物，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物 ．

（3）分離得到分解尿素的細(xì)菌后，如果要擴(kuò)大培養(yǎng)，則應(yīng)選擇 培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)．培養(yǎng)一段時(shí)間后，使用 對(duì)微生物細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)．計(jì)數(shù)過(guò)程中，下列哪種行為會(huì)影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性 A

A．計(jì)數(shù)時(shí)直接從靜置培養(yǎng)的試管底部取培養(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)

B．如果方格內(nèi)微生物細(xì)胞數(shù)量多于300 個(gè)，培養(yǎng)液先稀釋后再計(jì)數(shù)

C．如果微生物細(xì)胞有粘連，要數(shù)出團(tuán)塊中的每一個(gè)細(xì)胞

D．壓在方格線上的細(xì)胞只計(jì)左線和上線上的細(xì)胞數(shù)

（4）為了提高尿素肥效，可以將分解尿素的酶和尿素混合，制成“加酶尿素”．為了提高“加酶尿素”中酶的利用率，可采用 固定化酶 技術(shù)．

土壤是“微生物的天然培養(yǎng)基”，下面是有關(guān)土壤中分解尿素的細(xì)菌分離和計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)過(guò)程，請(qǐng)根據(jù)圖回答相關(guān)問(wèn)題：

（1）能分解尿素的細(xì)菌代謝類(lèi)型為 異氧需氧型 ，應(yīng)從富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層取土樣．

（2）為分離出土壤中分解尿素的細(xì)菌，應(yīng)該用 尿素為唯一氮源 的培養(yǎng)基進(jìn)行分離，并加入 酚紅 指示劑進(jìn)行鑒別．

（3）若取土樣5g，應(yīng)加入 45 ml的無(wú)菌水配制成稀釋10倍土壤溶液．因土壤中細(xì)菌密度很大，需要不斷加以稀釋?zhuān)�配制成如圖所示的不同濃度的土壤溶液．取樣稀釋前，一定要 搖均 以減少誤差．將103﹣107倍的稀釋液分別吸取0.1mL加入到固體培養(yǎng)基上，用 涂布器（玻璃刮刀） 將菌液鋪平．這種接種方法稱(chēng)為 稀釋涂布（平板）法 ．

（4）將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計(jì)具有 紅色環(huán)帶 （現(xiàn)象）的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中 105或106 倍的稀釋比較合適．

稀釋倍數(shù) 103 104 105 106 107

菌落數(shù)（個(gè)） 500 367 248 36 18

【生物﹣選修1生物技術(shù)實(shí)踐】

某研究小組設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如表所示．請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

KH2PO4 1.4g

Na2HPO4 2.1g

MgSO4?7H2O 0.2g

葡萄糖 10.0g

尿素 1.0g

瓊脂 15.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選 目的菌 ，這種培養(yǎng)基屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（2）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的 尿素 和 葡萄糖 ，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是 為目的菌提供氧氣 ．

（3）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用 涂布平板（劃線） 的方法接種，獲得 單菌落 后繼續(xù)篩選．

（4）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手．需要滅菌的是 ①② ；需要消毒的是 ③ ．（填序號(hào)）

（5）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落．A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有 ①②③ （填序號(hào)）．

①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基污染 ③由于操作失誤 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照

（6）在該實(shí)驗(yàn)中，可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是 微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高 ．所用方法是在培養(yǎng)基中加入 酚紅指示劑 ，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成紅色．

（2007?茂名一模）【《普通高中課程標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)教科書(shū)生物選修①》教材】

微生物與人類(lèi)關(guān)系密切．雖然有些微生物能使動(dòng)植物患病，但多數(shù)微生物對(duì)人類(lèi)是有益的．請(qǐng)回答有關(guān)微生物及其應(yīng)用的試題：

（1）培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基配方中一般含有水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽．從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌時(shí)，培養(yǎng)基中加的唯一氮源為 尿素 ，這種培養(yǎng)基稱(chēng)為 選擇 培養(yǎng)基．

（2）在制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的倒平板操作時(shí)，平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 皿蓋上會(huì)凝有水珠，防止水珠落人培養(yǎng)皿造成污染，還可使培養(yǎng)基表面的水分更好揮發(fā)

（3）微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和 稀釋涂布平板 法．在用平板劃線法接種時(shí)，為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？ 第一步灼燒接種環(huán)是防止接種環(huán)上有其它微生物而污染培養(yǎng)基，每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次接種時(shí)留下的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)自上次劃線的末端，以便通過(guò)多次劃線后，得到單個(gè)的菌落．劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染 在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 劃線結(jié)束后仍要灼燒接種環(huán)，以免菌種對(duì)環(huán)境造成污染

（4）荔枝是嶺南佳果，但季節(jié)性強(qiáng)，不耐儲(chǔ)藏．如果把荔枝制成果酒，則能明顯提高經(jīng)濟(jì)效益．在把荔枝制成果酒的過(guò)程中，很多因素會(huì)影響荔枝酒的產(chǎn)量．尤其是在制酒的第一步：把水果制成果汁時(shí)，出汁率較低，嚴(yán)重影響果酒產(chǎn)量．而果膠酶能明顯增加出汁率．為了解對(duì)于﹣定量的荔枝果泥，要使用多少果膠酶最合適，生物興趣小組同學(xué)提出了開(kāi)展探究活動(dòng)．請(qǐng)利用中學(xué)生物實(shí)驗(yàn)室常用器材以及下列實(shí)驗(yàn)材料用具，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)

步驟（實(shí)驗(yàn)課題名稱(chēng)、結(jié)果預(yù)測(cè)等略）．

實(shí)驗(yàn)材料和用具：荔枝果泥50ml、質(zhì)量濃度為5%的果膠酶母液20ml、大燒杯、相同規(guī)格試管若干支、溫度計(jì)、漏斗、量筒、吸管、濾紙等

設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟：

①取四支試管，編號(hào)為A、B、C、D；

②另取三支試管，編號(hào)為a、b、c．向三支試管中分別加人果膠酶母液2ml、4ml、6ml，加蒸餾水至10ml配成不同濃度的果膠酶溶液；

③向A、B、C、D四支試管各加人10mi果泥，并從a、b、c三試管中吸取2ml果膠酶液加入A、B、C三支試管，吸2ml蒸餾水加入D試管；

④將四支試管放在盛有溫水的大燒杯中水浴30min；

⑤分別過(guò)濾出四支試管的果汁，并記錄果汁量． ．

（2014?蘭州模擬）尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類(lèi)和數(shù)量繁多，同學(xué)們?cè)噲D探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌），培養(yǎng)基成分如表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

KH2PO4 1.4g

Na2HPO4 2.1g

MgSO4?7H2O 0.2g

葡萄糖 10g

尿素 1g

瓊脂 15g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到100mL

（1）此培養(yǎng)基能否用于植物組織培養(yǎng)？為什么？ 不能，缺乏植物激素 ．

（2）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖．則獲得圖A效果的接種方法是 稀釋涂布平板法 ，圖B效果的接種方法是 平板劃線法 ，一同學(xué)在純化土壤中的細(xì)菌時(shí)，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是 菌液濃度過(guò)高 （答出一條即可）．

（3）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源來(lái)自培養(yǎng)基中的 尿素 ，其同化作用類(lèi)型是 異養(yǎng)型 ．

（4）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選到 能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）， ，這種培養(yǎng)基從功能上屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（2014?和平區(qū)二模）某生物興趣小組以帶有落葉的表層土壤（深5cm左右）為實(shí)驗(yàn)材料，研究土壤微生物在適宜溫度下的分解作用，對(duì)土壤處理情況見(jiàn)下表．與此有關(guān)的敘述不正確的是（ ）

A.探究的問(wèn)題是不同土壤濕度條件下，土壤微生物對(duì)落葉的分解作用

B.該實(shí)驗(yàn)的自變量為土壤的是否滅菌處理，實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照組是1和3

C.為了控制實(shí)驗(yàn)中的無(wú)關(guān)變量，作為實(shí)驗(yàn)材料的落葉也應(yīng)進(jìn)行滅菌處理

D.預(yù)期結(jié)論是1、3組的落葉不被分解，2、4組中的落葉被不同程度的分解

（2013?惠州模擬）下列說(shuō)法正確的是（ ）

A.從落葉豐富的土壤中篩選能分解纖維索的細(xì)菌

B.家庭利用酵母菌制作腐乳

C.用紅色西瓜汁作還原糖鑒定的替代材料

D.觀察線粒體時(shí)，利用甲甚綠染液將線粒體染成綠色，再用顯微鏡觀察

欲從土壤中分離出能分解尿素的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)操作中不正確的是（ ）

A.將土壤用無(wú)菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋

B.同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個(gè)平板

C.可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對(duì)照

D.用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出分解尿素的細(xì)菌

為探究落葉是否在土壤微生物的作用下腐爛，下列各項(xiàng)構(gòu)成了一個(gè)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，其中不符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟襟E是（ ）

A.可選擇帶有落葉的土壤為實(shí)驗(yàn)材料，篩出落葉和土壤

B.將落葉平均分成兩份，把土壤也平均分成兩份

C.將滅菌的落葉設(shè)為實(shí)驗(yàn)組，不做處理的落葉設(shè)為對(duì)照組

D.將落葉分別埋入兩組土壤中，觀察腐爛情況