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家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。
(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用   酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。
(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的  和   之間。
(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg²⁺)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、          和           。
(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以           增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。

圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列�，F(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ 4種限制性核酸內(nèi)切酶,它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C^↓CGG、G^↓GATCC、^↓GATC、CCC^↓GGG。請回答下列問題:


(1)圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個(gè)堿基之間依次由       連接。
(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖1中DNA片段,產(chǎn)生的末端是   末端,其產(chǎn)物長度為        。
(3)若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被TA堿基對替換,那么基因D就突變?yōu)榛�因d。從雜合子中分離出圖1及其對應(yīng)的DNA片段,用限制酶SmaⅠ完全切割,產(chǎn)物中共有   種不同長度的DNA片段。
(4)若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是   。在導(dǎo)入重組質(zhì)粒后,為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌,一般需要用添加的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測,部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá),其最可能的原因是                                                                                     。

根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí),回答下列問題:
(1)限制性內(nèi)切酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有   和   。
(2)質(zhì)粒運(yùn)載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:
AATTC……G
G……CTTAA
為使運(yùn)載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性內(nèi)切酶切割,該酶必須具有的特點(diǎn)是                                                                 。
(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即   DNA連接酶和   DNA連接酶。
(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是   ,產(chǎn)物是   。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常采用   技術(shù)。
(5)基因工程中除質(zhì)粒外,   和   也可作為運(yùn)載體。
(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般情況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是                                                                                           。

普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱,有人將地衣芽孢桿菌的α淀粉酶基因轉(zhuǎn)入酵母菌中,經(jīng)篩選得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌種(過程如圖甲所示)。

(1)圖甲中,過程①需要的酶有           。為達(dá)到篩選目的,平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基應(yīng)以
     作為唯一碳源。②、③過程需重復(fù)幾次,目的是                            。
(2)某同學(xué)嘗試過程③的操作,其中一個(gè)平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示。該同學(xué)的接種方法是             ;推測該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是        。 
(3)以淀粉為原料,用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的適宜條件下密閉發(fā)酵,接種   菌的發(fā)酵罐需要先排氣,其原因是                                                                     。
(4)用凝膠色譜法分離α淀粉酶時(shí),在色譜柱中移動(dòng)速度較慢的蛋白質(zhì),相對分子質(zhì)量較   。 

閱讀如下資料:
資料甲:科學(xué)家將牛生長激素基因?qū)�入小鼠受精卵�?得到了體型巨大的“超級小鼠”;科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。
回答下列問題:
資料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用   法。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶是       和           。在培育有些轉(zhuǎn)基因植物時(shí),常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,農(nóng)桿菌的作用是。

下圖是生物膜流動(dòng)鑲嵌模型及物質(zhì)跨膜運(yùn)輸示意圖，其中離子通道是一種通道蛋白，該通道蛋白是橫跨質(zhì)膜的親水性通道，具有離子選擇性。請據(jù)圖回答有關(guān)問題。

(1)很多研究成果有力支持“脂溶性物質(zhì)易透過生物膜，不溶于脂質(zhì)的物質(zhì)不易透過生物膜”這一說法。這證明組成細(xì)胞膜的主要成分中有[ ]       。
(2)鯊魚體內(nèi)能積累大量的鹽，鹽分過高時(shí)就要及時(shí)將多余的鹽分排出體外，經(jīng)研究，鯊魚體內(nèi)多余的鹽分是經(jīng)②途徑排出的，那么其跨膜運(yùn)輸?shù)姆绞绞?u>            。
(3)對蟾蜍的離體心臟施加某種毒素后Ca²⁺的吸收明顯減少，但K⁺、C₆H₁₂O₆的吸收不受影響，最可能的原因是該毒素抑制了心肌細(xì)胞膜上轉(zhuǎn)運(yùn)Ca²⁺的[ ]________
的活性。
(4)檉柳是泌鹽植物，葉子和嫩枝可以將吸收到植物體內(nèi)的鹽分排出，是強(qiáng)耐鹽植物。檉柳從土壤中吸收無機(jī)鹽的方式是主動(dòng)運(yùn)輸還是被動(dòng)運(yùn)輸，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)加以探究。
①實(shí)驗(yàn)步驟。
a.取甲、乙兩組生長發(fā)育相同的檉柳幼苗，放入適宜濃度的含有Ca²⁺、K⁺的溶液中。
b.甲組給予正常的呼吸條件，乙組____________________________________。
c. _______________________________________________________________。
②實(shí)驗(yàn)結(jié)論。
a.若兩組植株對Ca²⁺、K⁺的吸收速率相同，則說明__________________________
___________________________________________________________________ 
_________________________________________________________________ ；
b.若兩組植株對Ca²⁺、K⁺的吸收速率不相同，甲組比乙組快，則說明 ____________
_________________________________________________________________ 。

克隆豬成功率較低,與早期胚胎細(xì)胞的異常凋亡有關(guān)。Bcl2基因是細(xì)胞凋亡抑制基因,用PCR技術(shù)可以檢測該基因轉(zhuǎn)錄水平,進(jìn)而了解該基因與不同胚胎時(shí)期細(xì)胞凋亡的關(guān)系�？寺∝i的培育及該基因轉(zhuǎn)錄水平檢測流程如下圖。

請回答:
(1)圖中重組細(xì)胞的細(xì)胞核來自   細(xì)胞,早期胚胎移入受體子宮后繼續(xù)發(fā)育,經(jīng)桑椹胚、囊胚和   胚最終發(fā)育為克隆豬。
(2)在PCR過程中可檢測出cDNA中Bcl2 cDNA的分子數(shù),進(jìn)而計(jì)算總mRNA中Bcl2 mRNA的分子數(shù),從而反映出Bcl2基因的轉(zhuǎn)錄水平。
①圖中X表示   過程。
②從基因組數(shù)據(jù)庫中查詢Bcl2 mRNA的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列設(shè)計(jì)合成   用于PCR擴(kuò)增,PCR過程第一輪循環(huán)的模板是                                                          。

紅豆杉是瀕危植物,其樹皮產(chǎn)生的紫杉醇對癌癥有一定的療效。如圖是紅豆杉植株組織培養(yǎng)和細(xì)胞培養(yǎng)的流程圖。
請據(jù)圖回答下列問題。
(1)圖中②為愈傷組織,通過B過程可最終產(chǎn)生新的植株,通過C過程可產(chǎn)生大量細(xì)胞,則圖中A、B、C分別表示的過程為                 。其中B過程的實(shí)質(zhì)是              。
(2)對⑤的培養(yǎng)一般要采用   培養(yǎng)基,且要不斷通入無菌空氣并進(jìn)行攪拌,其目的是    
                                                                              
        。
(3)對⑤的培養(yǎng)可獲得代謝產(chǎn)物——紫杉醇,但培養(yǎng)后期紫杉醇產(chǎn)量下降,其原因包括      等。
(4)若①是紅豆杉(基因型為DdTt)的花藥,可選用   (填編號(hào))制成人工種子,該“種子”萌發(fā)的幼苗用   處理,可快速獲得純種植株,該植株的基因型為   。

絮凝性細(xì)菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能與石油污水中的懸浮顆粒和有機(jī)物等形成絮狀沉淀,起到凈化污水的作用。為進(jìn)一步提高對石油污水的凈化效果,將絮凝性細(xì)菌和石油降解菌融合,構(gòu)建目的菌株。其流程圖如下。

據(jù)圖回答:
(1)溶菌酶的作用是                                                                     。
(2)PEG的作用是                                                                      。
(3)經(jīng)處理后,在再生培養(yǎng)基上,未融合的A、B難以生長。圖中AB融合菌能生長和繁殖的原因是      。
(4)目的菌株的篩選:篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有    的培養(yǎng)基上生長的AB融合菌,選擇效果最好的作為目的菌株。
(5)為探究目的菌株不同發(fā)酵時(shí)間發(fā)酵液的絮凝效果,將目的菌株進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),定時(shí)取發(fā)酵液,加入石油污水中;同時(shí)設(shè)置       為對照組。經(jīng)攪拌、靜置各3分鐘后,分別測定上層水樣的石油濃度和COD值(COD值越高表示有機(jī)物污染程度越高),計(jì)算石油去除率和COD去除率,結(jié)果如下圖。

(6)目的菌的種群增長曲線呈   型。在40~44小時(shí),發(fā)酵液對石油污水的凈化效果最好,其原因是                                                                                        。

某研究組對秈稻開展了組織培養(yǎng)及相關(guān)研究,請回答下列問題:
(1)2,4D常用于秈稻愈傷組織的誘導(dǎo),對形態(tài)的發(fā)生有一定的抑制作用。為促進(jìn)愈傷組織再分化,在配制分化培養(yǎng)基時(shí)需   (填“升高”、“保持”或“降低”)2,4D的濃度。
(2)當(dāng)秈稻愈傷組織在只含有細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)時(shí),出現(xiàn)具有分生能力的綠色芽點(diǎn),但不能繼續(xù)出芽,通常在培養(yǎng)基中添加      ,以促進(jìn)幼苗形成。
(3)研究中用顯微鏡可以觀察到的現(xiàn)象是   (填下列序號(hào))。
①綠色芽點(diǎn)細(xì)胞排列松散
②剛?cè)诤系亩i稻和稗草雜交細(xì)胞發(fā)生質(zhì)壁分離
③胚狀體細(xì)胞中有葉綠體
④分化的愈傷組織內(nèi)各細(xì)胞的形態(tài)大小一致
(4)經(jīng)組織培養(yǎng)篩選獲得的秈稻葉綠素突變體,其葉綠素a與葉綠素b的比值顯著大于對照,葉綠素總量不變。某同學(xué)用   (填序號(hào):①綠色;②紅色色;③藍(lán)紫色色;④黃色)光照射突變體和對照葉片,檢測到兩者光合放氧速率差異不大。若取等量色素提取液進(jìn)行層析,會(huì)發(fā)現(xiàn)突變體第   條色素帶(自上而下)窄于對照組。
(5)胚乳(3n)由一個(gè)精子與兩個(gè)極核受精發(fā)育而成。若用秈稻種子的胚乳誘導(dǎo)愈傷組織,培育三倍體,需適時(shí)剔除胚,以免胚的存在影響愈傷組織細(xì)胞的   ,還可避免再生苗中混有   。