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下圖是獲得抗蟲棉的技術(shù)流程示意圖�？�那霉素抗性基因(kan^r)常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下列敘述正確的是(　　)

A．構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中需要限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶

B．愈傷組織的分化產(chǎn)生了不同基因型的植株

C．卡那霉素抗性基因(kan^r)中有該過程所利用的限制性內(nèi)切酶的識別位點(diǎn)

D．抗蟲棉有性生殖后代都能保持抗蟲性狀的穩(wěn)定遺傳

下列敘述符合基因工程概念的是(　　)

A．B淋巴細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合，雜交瘤細(xì)胞中含有B淋巴細(xì)胞中的抗體基因

B．將人的干擾素基因重組到質(zhì)粒后導(dǎo)入大腸桿菌，獲得能產(chǎn)生人干擾素的菌株

C．用紫外線照射青霉菌，使其DNA發(fā)生改變，通過篩選獲得青霉素高產(chǎn)菌株

D．自然界中天然存在的噬菌體自行感染細(xì)菌后其DNA整合到細(xì)菌DNA上

某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究，下列相關(guān)敘述，正確的是 (　　)

A．與纖維母細(xì)胞相比，過程①形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較低

B．過程②是誘導(dǎo)干細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程

C．每個Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體，故過程③不需要選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選

D．過程④產(chǎn)生的單抗，不需細(xì)胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細(xì)胞外

（14分）下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tet^R表示四環(huán)素抗性基因，amp^R表示氨芐青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點(diǎn)。

據(jù)圖回答：

(1)圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用________________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含________的培養(yǎng)基上進(jìn)行。

(2)能使人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是________(填字母代號)。

A．啟動子    B．tet^R

C．復(fù)制原點(diǎn)  D．amp^R

(3)過程①可采用的操作方法是________(填字母代號)。

A．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化  B．大腸桿菌轉(zhuǎn)化

C．顯微注射    D．細(xì)胞融合

(4)過程②采用的生物技術(shù)是________________。

(5)對早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。這利用了細(xì)胞的________性。

(6)為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用________(填字母代號)技術(shù)。

A．核酸分子雜交    B．基因序列分析

C．抗原—抗體雜交  D．PCR

（10分）紅細(xì)胞生成素(EPO)是體內(nèi)促進(jìn)紅細(xì)胞生成的一種糖蛋白，可用于治療腎衰性貧血等疾病。由于天然EPO來源極為有限，目前臨床上使用的紅細(xì)胞生成素主要來自于基因工程技術(shù)生產(chǎn)的重組人紅細(xì)胞生成素(rhEPO)，其簡要生產(chǎn)流程如下圖。

請回答：

(1)圖中①所指的是         技術(shù)。

(2)圖中②所指的物質(zhì)是           ，③所指的物質(zhì)是             。

(3)培養(yǎng)重組CHO細(xì)胞時，為便于清除代謝產(chǎn)物，防止細(xì)胞產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害，應(yīng)

定期更換         _。

(4)檢測rhEPO的體外活性需用抗rhEPO的單克隆抗體。分泌該單克隆抗體的______細(xì)胞，可由rhEPO免疫過的小鼠B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合而成。

（12分）草莓生產(chǎn)上傳統(tǒng)的繁殖方式易將所感染的病毒傳播給后代，導(dǎo)致產(chǎn)量降低、品質(zhì)變差。運(yùn)用微型繁殖技術(shù)可以培育出無病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本過程如下：

外植體愈傷組織芽根―→植株

請回答：

(1)微型繁殖培育無病毒草莓時，一般選取____________作為外植體，其依據(jù)是________________。

(2)在過程①中，常用的MS培養(yǎng)基主要成分包括大量元素、微量元素和____________，在配制好的培養(yǎng)基中，常常需要添加____________，有利于外植體啟動細(xì)胞分裂形成愈傷組織。接種后2～5 d，若發(fā)現(xiàn)外植體邊緣局部污染，原因可能是____________。

(3)在過程②中，愈傷組織在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是____________________________________________。

（14分）人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中，經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒，該病毒表面的A蛋白為主要抗原，其疫苗生產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖：

請回答：

（1）過程①代表的是         。

（2）過程②構(gòu)建A基因表過載體時，必須使用___        和          兩種工具酶。

（3）過程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是        ，其原理是             。

（4）對健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時，可選用圖中基因工程生產(chǎn)的          所制備的疫苗。對該傳染病疑似患者確診時，可從疑似患者體內(nèi)分離病毒，與已知病毒進(jìn)行                比較。

番茄不易儲存與多聚乳糖醛酸酶（PG）有關(guān)，科學(xué)家將人工合成的反義多聚乳糖醛酸酶基因?qū)�入番茄，獲得轉(zhuǎn)基因延熟番茄，是番茄的存儲時間大大延長。已知質(zhì)粒上有Pst I、Sma I 、Hind III 、 Alu I 等四種限制酶切割位點(diǎn)。下圖是轉(zhuǎn)基因延熟番茄培育過程的示意圖（a mpr為抗氨芐青霉素基因），其中1~ 4是培育過程中的相關(guān)步驟，I 、II是相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請據(jù)圖作答。

例1  在構(gòu)建含反義多聚乳糖醛酸酶基因的表達(dá)載體時，若用Sma I與Pst I完全酶切含目的基因的DNA后，反應(yīng)管中有________種片段。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接，實(shí)際操作中，一般應(yīng)選用限制酶___________，分別同時對_____________進(jìn)行切割。

例2  通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，可將帶有目的基因的T-DNA（重組質(zhì)粒）導(dǎo)入番茄細(xì)胞。導(dǎo)入番茄細(xì)胞的目的基因，通常插入到細(xì)胞核某一條染色體的DNA上，使目的基因的遺傳特性得以____________________。上述途徑所獲得的番茄，其后代并非每一個個體都含目的基因，原因是                    。

 (3) 為了檢測番茄細(xì)胞是否導(dǎo)入了目的基因，可以采用特定的DNA分子探針進(jìn)行檢測，也可以向植物組織培養(yǎng)基中加入_______________，以篩選獲得導(dǎo)入上述重組質(zhì)粒的特定受體細(xì)胞。

向正常番茄細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入反義多聚乳糖醛酸酶基因后，發(fā)現(xiàn)多聚乳糖醛酸酶基因能正常轉(zhuǎn)錄形成mRNA，但細(xì)胞內(nèi)卻不再合成多聚乳糖醛酸酶（PG），其原因最可能是____________。

下列哪一項(xiàng)不屬于“細(xì)胞學(xué)說”的主要內(nèi)容(　　)

A．所有的生物都是由細(xì)胞構(gòu)成的

B．所有植物和動物都是由細(xì)胞構(gòu)成的

C．細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位

D．細(xì)胞只能由細(xì)胞分裂而來

對下圖所示細(xì)胞的概述正確的是(    )

A．甲、乙、丙和丁四種細(xì)胞中都有核糖體

B．依據(jù)同化作用方式劃分，乙和丙代表的生物為異養(yǎng)型，甲和丁代表的生物為自養(yǎng)型

C．細(xì)胞核或擬核中含有自身全部遺傳信息，是細(xì)胞結(jié)構(gòu)中最重要的部分

D．丙和丁細(xì)胞只含有細(xì)胞膜，沒有核膜和細(xì)胞器