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番茄營(yíng)養(yǎng)豐富，是人們喜愛(ài)的一類(lèi)果蔬。但普通番茄細(xì)胞中含有多聚半乳糖醛酸酶基因，控制細(xì)胞產(chǎn)生多聚半乳糖醛酸酶，該酶能破壞細(xì)胞壁，使番茄軟化，不耐貯藏。為滿(mǎn)足人們的生產(chǎn)生活需要，科學(xué)家們通過(guò)基因工程技術(shù)，培育出了抗軟化、保鮮時(shí)間長(zhǎng)的番茄新品種。操作流程如圖，請(qǐng)回答：

（1）在番茄新品種的培育過(guò)程中，將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的方法叫做          。

（2）從圖中可見(jiàn)，mRNAl和mRNA2的結(jié)合直接導(dǎo)致了                 無(wú)法合成，最終使番茄獲得了抗軟化的性狀。

（3）普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后，經(jīng)③過(guò)程形成       ，然后誘導(dǎo)出試管苗，進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。

（4）如圖甲，獲得目的基因后，構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性?xún)?nèi)切酶作用于圖中的      處，DNA連接酶作用于       處。（填“a”或“b”）

（5）如圖乙是該目的基因表達(dá)過(guò)程中的一個(gè)階段，圖中3和4的核苷酸相同否？   

說(shuō)明理由                                              。

通過(guò)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速繁殖、生產(chǎn)藥物及培育無(wú)病毒的植物等。請(qǐng)據(jù)圖甲、表乙回答問(wèn)題：

表乙：植物的花芽分別在含有不同比例的吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)狀況

（1）離體的植物器官、組織或細(xì)胞能夠被培養(yǎng)成新成新的植物體的原因是____________________。

（2）由植物組織培養(yǎng)方法誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀體結(jié)構(gòu)，若包上人造種皮，制成人工種子，可能解決有些作物品種繁殖能力差、結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問(wèn)題。胚狀體來(lái)源于離體的植物體細(xì)胞，其形成過(guò)程中要經(jīng)過(guò)的生理變化大體上是圖甲中[    ]________和[    ]___________過(guò)程。

（3）應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)莖尖或根尖組織可獲得無(wú)病毒植株，其原因是___________。

（4）從表乙的實(shí)驗(yàn)結(jié)果可看出：吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素是實(shí)驗(yàn)中的二種重要物質(zhì)。其中，新芽形成必須的條件是                           ；而在培養(yǎng)形成完整新個(gè)體過(guò)程中，對(duì)它們的調(diào)控關(guān)鍵是                                       。

植物細(xì)胞原生質(zhì)體的制備是植物體細(xì)胞雜交、原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化等技術(shù)的基礎(chǔ)。下圖表示利用機(jī)械法和酶解法制備原生質(zhì)體的簡(jiǎn)要過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答：

（1）將植物葉片放在較高濃度的蔗糖溶液中，一段時(shí)間后，在細(xì)胞的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜之間充滿(mǎn)了___________，原因是______________________。

（2）機(jī)械法是指剪碎已經(jīng)發(fā)生質(zhì)壁分離的組織時(shí)，有些細(xì)胞只被剪去細(xì)胞壁，釋放出完整原生質(zhì)體的方法。使用這種方法，蔗糖溶液濃度對(duì)獲得原生質(zhì)體的數(shù)量和活性有很大影響，濃度過(guò)低會(huì)造成___________，易剪碎原生質(zhì)體；濃度過(guò)高，則會(huì)使___________。

（3）用酶解法制備原生質(zhì)體的過(guò)程中，一般使用___________處理葉片。與機(jī)械法相比，酶解法的優(yōu)點(diǎn)是_________________________________。

研究性學(xué)習(xí)小組參觀(guān)某市市郊建立的以沼氣為中心，以保護(hù)生態(tài)環(huán)境為目標(biāo)的“豬—沼—魚(yú)—肥—果蔬”生態(tài)模式時(shí)繪出了如下模式圖，請(qǐng)分析回答：

（1）構(gòu)建以沼氣為中心的“豬—沼—魚(yú)—肥—果蔬”生態(tài)模式時(shí)主要依據(jù)的生態(tài)學(xué)原理  是                 　，該生態(tài)系統(tǒng)最大的優(yōu)點(diǎn)是　　    　         　     。

（2）該生態(tài)系統(tǒng)的“基石”是　    ，若要生產(chǎn)3kg雞肉最少需要水稻和大豆共　　kg。

（3）沼氣池中的產(chǎn)甲烷菌在生態(tài)學(xué)上的作用主要是                      　     。

（4）若農(nóng)田內(nèi)有害蟲(chóng)發(fā)生，采用何種措施既能保護(hù)環(huán)境又能有效防治害蟲(chóng)？（寫(xiě)出2種）

（5）從生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)分析，焚燒秸稈對(duì)農(nóng)田生態(tài)系統(tǒng)的影響是________________，焚燒秸桿主要破壞了生態(tài)工程的哪一原理？__________________。

基因克隆是對(duì)分離出來(lái)的目的基因進(jìn)行大量擴(kuò)增的過(guò)程。經(jīng)過(guò)基因克隆，可以生產(chǎn)出大量的目的基因或在基因表達(dá)時(shí)獲得大量的蛋白質(zhì)。細(xì)菌質(zhì)粒是基因克隆的合適載體，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，某些細(xì)菌質(zhì)粒中含有兩個(gè)抗生素抗性基因——氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因，而且，在四環(huán)素抗性基因中存在限制酶的單一識(shí)別序列。

下圖表示利用質(zhì)粒進(jìn)行基因克隆的過(guò)程，其中A-D表示物質(zhì)，I和II表示抗性基因，①—⑦表示過(guò)程，其它數(shù)字表示菌落，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）寫(xiě)出下列字母和編號(hào)的名稱(chēng)：A：         ； II：          。

（2）將A和B形成D所需的酶是        。⑤過(guò)程中為提高成功率，常用        溶液處理大腸桿菌。

（3）為篩選含有物質(zhì)A的細(xì)菌，需進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，先在培養(yǎng)基（一）中只加入氨芐青霉素，一段時(shí)間后，培養(yǎng)基上長(zhǎng)出的細(xì)菌菌落具有        特性。然后，用滅菌絨布從培養(yǎng)基（一）中蘸取菌種，再按到只含四環(huán)素的培養(yǎng)基（二）中培養(yǎng)。根據(jù)培養(yǎng)基（一）和（二）上的細(xì)菌生長(zhǎng)情況，可以判斷圖中菌落        （填數(shù)字）即為篩選出的含有物質(zhì)A的細(xì)菌，原因是                                        。

胚胎工程技術(shù)包含的內(nèi)容很豐富，下圖是胚胎工程技術(shù)研究及應(yīng)用的相關(guān)情況，其中供體1是良種荷斯坦高產(chǎn)奶牛，供體2是黃牛，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）應(yīng)用1中獲得的小牛，其遺傳物質(zhì)來(lái)源于               ，為一次獲得多個(gè)細(xì)胞B，往往需要向供體2內(nèi)注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是                                     。

  （2）將優(yōu)良公牛的精子收集后放在一定濃度的肝素溶液中進(jìn)行培養(yǎng)，其目的是                                    。

  （3）通過(guò)應(yīng)用2獲得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是                。

  （4）應(yīng)用3中的細(xì)胞D取自囊胚的           ，細(xì)胞C取自牛胎兒的            。

  （5）應(yīng)用4中獲得二分胚①和②，移植到受體牛中得到兩只小牛，兩只小牛的性別是            。

下圖為培育轉(zhuǎn)基因小鼠的部分過(guò)程示意圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）若需在短時(shí)間內(nèi)獲得較多的外源基因，通常采用        技術(shù)。

（2）圖中的A細(xì)胞通常為      細(xì)胞，將外源基因?qū)�入該�?xì)胞常用的方法是          。

（3）仔鼠出生后可用其尾巴進(jìn)行DNA檢測(cè)，通過(guò)         方法，檢測(cè)出攜帶外源基因的小鼠。至于外源基因是否合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可從轉(zhuǎn)基因小鼠中提取蛋白質(zhì)，并用相應(yīng)的抗體進(jìn)行       雜交，若有雜交帶出現(xiàn)，則表明小鼠體內(nèi)的外源基因            。

（4）在外源基因?qū)�入小鼠的A細(xì)胞時(shí)，外源基因可能隨機(jī)地插入到該細(xì)胞的DNA中。這些細(xì)胞有的能發(fā)育成轉(zhuǎn)基因小鼠，有的卻死亡。請(qǐng)分析外源基因插入后導(dǎo)致有些A細(xì)胞死亡的最可能原因                                                。

現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì)，實(shí)驗(yàn)室研究人員欲通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法來(lái)鑒定它們是否有毒性并比較二者毒性的強(qiáng)弱。請(qǐng)你以一個(gè)研究人員的身份參與此項(xiàng)研究，完成下列有關(guān)問(wèn)題：   

 Ⅰ．實(shí)驗(yàn)原理：                                                 。

根據(jù)這種變異細(xì)胞占全部培養(yǎng)細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（以下稱(chēng)Q值），可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性。

 Ⅱ．材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、動(dòng)物細(xì)胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)甲溶液、適宜濃度的化學(xué)物質(zhì)乙溶液、蒸餾水、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常有絲分裂各時(shí)期的高倍顯微照片。

 Ⅲ．實(shí)驗(yàn)步驟：

 （1）制備細(xì)胞懸浮液。

把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉(zhuǎn)入錐形瓶中，加入胰蛋白酶液處理，使胚胎組織離散成單個(gè)細(xì)胞，再加入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液，制成細(xì)胞懸浮液。

 （2）進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。

①取A、B、C 3個(gè)潔凈的培養(yǎng)瓶，                        ；

②A(yíng)、B兩個(gè)培養(yǎng)瓶中分別加入等量的甲、乙溶液。C瓶中加入等量的蒸餾水，搖勻；

③                                                        

（3）制作臨時(shí)裝片。

①當(dāng)細(xì)胞增殖到大約8代左右時(shí)，同時(shí)從恒溫箱中取出3個(gè)培養(yǎng)瓶，用胰蛋白酶液處理，加入動(dòng)物細(xì)胞固定液，迅速殺死細(xì)胞并固定細(xì)胞分裂相；

②靜置一段時(shí)間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細(xì)胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號(hào)的載玻片的中央，                                    ，3min~5min后，蓋上蓋玻片。

（4）鏡檢和統(tǒng)計(jì)。

把臨時(shí)裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于             期的細(xì)胞，并與                  進(jìn)行對(duì)比，統(tǒng)計(jì)并計(jì)算該期變異的細(xì)胞占該期細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)（Q值）。

Ⅳ．結(jié)果分析與結(jié)論：

（1）經(jīng)研究人員實(shí)驗(yàn)得知，A、B、C三個(gè)培養(yǎng)瓶的Q值依次為：QA=1.3%，QB=12.5%，QC=0.1%，由此可知該實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是                                        。

（2）在實(shí)驗(yàn)中，C培養(yǎng)瓶起         作用，C瓶的Q值說(shuō)明                    。

下列有關(guān)酶的制備和應(yīng)用敘述正確的是 

A．酶解法和吸水漲破法常用于制備微生物的胞內(nèi)酶

B．透析、電泳和酸解等方法常用于酶的分離與純化

C．棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進(jìn)行洗滌

D．多酶片中的胃蛋白酶位于片劑的核心層

對(duì)基因表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是

A．需要限制酶和DNA連接酶參與       B．基因表達(dá)載體中含有啟動(dòng)子和內(nèi)含子

C．通常用抗生素基因作為標(biāo)記基因         D．基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心