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下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，正確的是

A．培養(yǎng)中的人效應(yīng)T細(xì)胞能產(chǎn)生單克隆抗體   

B．培養(yǎng)中的人B細(xì)胞能夠無限地增殖

C．人的成熟紅細(xì)胞經(jīng)過培養(yǎng)能形成細(xì)胞株     

D．用胰蛋白酶處理肝組織可獲得單個(gè)肝細(xì)胞

關(guān)于受精過程的敘述錯(cuò)誤的是

A．獲能后的精子與卵子相遇后，釋放頂體酶穿過透明帶進(jìn)入放射冠

B．透明帶反應(yīng)是防止多精入卵受精的第一道屏障

C．精子與卵黃膜相互融合，精子入卵子          

D．雄原核形成的同時(shí)，卵子完成第二次減數(shù)分裂

下列哪項(xiàng)明顯體現(xiàn)了轉(zhuǎn)基因生物引發(fā)的食物安全問題

A．轉(zhuǎn)基因豬的細(xì)胞中含有人的生長激素基因，因而豬的生長速度快，個(gè)體大

B．轉(zhuǎn)基因大米中含有β一胡蘿卜素，營養(yǎng)豐富，產(chǎn)量高

C．轉(zhuǎn)基因植物合成的某些新蛋白質(zhì)，引起個(gè)別人過敏

D．讓轉(zhuǎn)基因牛為人類生產(chǎn)凝血因子，并在牛奶中提取

嚴(yán)重沖擊婚姻、家庭和兩性關(guān)系等倫理道德觀念的技術(shù)是

A．利用動(dòng)物克隆技術(shù)克隆人     

B．通過基因治療手段治療人類的遺傳病

C．利用現(xiàn)代生物技術(shù)有效確認(rèn)身份和偵破案件

D．利用人類基因序列，生產(chǎn)基因工程產(chǎn)品、分析病理、治療疾病[ 

2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

    注：圖中通過過程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G^↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—^↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。

（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來        ，理由是：                                   。

（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多的方法是          。

（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是           。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是，可以避免                        。

（4）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：            （用數(shù)字表示）。

①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸

②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列

③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）

④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。

目前所用的質(zhì)粒載體主要是以天然細(xì)菌質(zhì)粒的各種元件為基礎(chǔ)重新組建的人工質(zhì)粒，pBR322質(zhì)粒是較早構(gòu)建的質(zhì)粒載體，其主要結(jié)構(gòu)如圖所示。

(1)構(gòu)建人工質(zhì)粒時(shí)要有抗性基因，以便于                               。

(2)pBR322分子中有單個(gè)EcoR I限制酶作用位點(diǎn)，EcoR 1只能識(shí)別序列一GAATTC一，并只能在G與A之間切割。若在某目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)EcoR I的切點(diǎn)，請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶EcoR I切割后所形成的黏性末端。

(3)pBR322分子中另有單個(gè)的BamHI限制酶作用位點(diǎn)，現(xiàn)將經(jīng)BamHI處理后的質(zhì)粒與用另一種限制酶BgIⅡ處理得到的目的基因，通過DNA連接酶作用恢復(fù)___     ___ 鍵，成功的獲得了重組質(zhì)粒。

 (4)為了檢測上述重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入原本無ampR和tetR的大腸桿菌，將大腸桿菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖二的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上，使絨布面沾上菌落，然后將絨布按到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到如圖三的結(jié)果(空圈表示與圖二對(duì)照無菌落的位置)。與圖三空圈相對(duì)應(yīng)的圖二中的菌落表現(xiàn)型是___       _____ ，圖三結(jié)果顯示，多數(shù)大腸桿菌導(dǎo)入的是___            __。

野生馬鈴薯品種的植株具有較強(qiáng)的抗病、抗蟲、抗鹽堿、抗寒能力，但塊莖不能食用。俄、德、芬蘭專家共同做實(shí)驗(yàn)研究，用野生馬鈴薯與馬鈴薯的體細(xì)胞進(jìn)行雜交，培育出了生活能力強(qiáng)的雜交系馬鈴薯。

(1)專家在實(shí)驗(yàn)中，需用到的酶主要有                和             酶等。

(2)專家在實(shí)驗(yàn)中，需要用到聚乙二醇（PEG），其目的是                    。

(3)農(nóng)民種植雜交系馬鈴薯除可獲得較高的收成外，還有什么優(yōu)點(diǎn)？（寫出兩點(diǎn)）。

(4)運(yùn)用此植物體細(xì)胞雜交法可使本來存在著生殖隔離的物種進(jìn)行雜交，培育出兼有兩物種品質(zhì)的優(yōu)良物種，最好用下列哪種方法？               （    ）

A、單倍體育種法   B、雜交育種法   C、植物組織培養(yǎng)法  D、花藥離體培養(yǎng)法

2N/4N 嵌合體胚胎是指用四倍體 (4N )胚胎與二倍體胚胎(2N )或胚胎干細(xì)胞 (ES 細(xì)胞)進(jìn)行聚合，形成由二倍體和四倍體細(xì)胞組成的嵌合體。2N/4N 嵌合體胚胎的構(gòu)建常用方法如下圖，請據(jù)圖分析回答：

（1）受精卵是胚胎發(fā)育的開端，圖中的卵細(xì)胞達(dá)到                   時(shí)期，才具備受精的能力，而精子需經(jīng)過               過程才能和卵細(xì)胞結(jié)合。

（2）2N的ES細(xì)胞來自胚胎發(fā)育過程的               期，本實(shí)驗(yàn)中從功能上說明了該細(xì)胞                   。

（3）2n/4n 嵌合體胚胎的構(gòu)建用到的現(xiàn)代生物工程技術(shù)主要有：                     

重癥聯(lián)合性免疫缺陷病是一種體液免疫、細(xì)胞免疫同時(shí)有嚴(yán)重缺陷的疾�。ê喎QSCID），這種患者缺乏正常的人體免疫功能，只要稍被細(xì)菌或病毒感染，就會(huì)發(fā)病死亡。經(jīng)研究證實(shí)，SCID病人細(xì)胞的一個(gè)常染色體上編碼腺苷酸脫氨酶（簡稱ADA）的基因ada發(fā)生了突變。目前，人們已經(jīng)找到了治療該疾病的方案。如下圖：

（1）下列不是運(yùn)載體必須具備的是（     ）

A．能在宿主細(xì)胞中復(fù)制并保存      B．具有多個(gè)限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接

C．具有標(biāo)記基因，便于進(jìn)行篩選     D．是環(huán)狀形態(tài)的DNA分子

（2）在此圖過程中用到的基因操作工具分別是                                  。

（3）研究人員將ada注入淋巴細(xì)胞，而不是其他細(xì)胞，其原因是什么？            。

（4）圖中的治療方法是_______（體內(nèi)或體外）基因治療法，這是______    _____生物技術(shù)的應(yīng)用。請列舉除了在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，該生物技術(shù)在其他領(lǐng)域的一些成就：                。

（5）SCID病人的血液能作為實(shí)驗(yàn)“DNA粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)材料嗎？       ，為什么？

 葉綠體是植物進(jìn)行光合作用的場所，下列關(guān)于葉綠體結(jié)構(gòu)與功能的敘述，正確的是：

A. 光合作用中O₂的生成過程發(fā)生在葉綠體基質(zhì)中

B. 葉綠體中的色素主要分布在類囊體腔內(nèi)

C. CO₂的固定過程發(fā)生在類囊體薄膜上

D. 光合作用的產(chǎn)物——淀粉是在基質(zhì)中合成的