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單克隆抗體制備過程中所用的骨髓瘤細(xì)胞是一種基因缺陷型細(xì)胞，其合成核酸的途徑能被氨基喋呤阻斷�，F(xiàn)將從預(yù)先注射了某種抗原的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞與上述骨髓瘤細(xì)胞混合，加入PEG促融后，再加入含氨基喋呤的培養(yǎng)液。若將這些混合物分裝于細(xì)胞培養(yǎng)板的小孔中培養(yǎng)（如右圖所示），則小孔中的培養(yǎng)物不可能出現(xiàn)的結(jié)果是

   A．沒有活細(xì)胞，產(chǎn)生抗體

   B．沒有活細(xì)胞，不產(chǎn)生抗體

   C．細(xì)胞分裂繁殖，產(chǎn)生抗體，專一性抗體檢驗呈陰性

   D．細(xì)胞分裂繁殖，產(chǎn)生抗體，專一性抗體檢驗呈陽性

1970年，特明和巴爾德摩證實了RNA病毒能依賴RNA合成DNA的過程，并發(fā)現(xiàn)了催化此過程的酶。下面為形成cDNA的過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。請根據(jù)圖解分析，下列說法不正確的是(　　)

A．催化①過程的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶

B．從圖示可以看出要將堿基對之間的氫鍵斷開可以用核酸酶H和高溫處理

C．從圖中信息分析可知，②⑤過程為DNA復(fù)制，催化⑤過程的酶能耐高溫

D．如果RNA單鏈中有堿基100個，其中A占25%，U占15%，則通過該過程合成的一個雙鏈DNA片段中有胞嘧啶30個

（20分）利用動物乳腺生產(chǎn)產(chǎn)品的技術(shù)稱為動物乳腺反應(yīng)器技術(shù)。2005年青島“嶗山奶山羊乳腺生物反應(yīng)器的研制”項目通過鑒定，該項目生產(chǎn)的藥用蛋白具有表達(dá)效率高、成本低、安全性高、易于分離純化的優(yōu)點，可產(chǎn)生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等醫(yī)藥產(chǎn)品，造福人類健康。下圖為利用生物技術(shù)獲得生物這一新品種和抗蟲棉的過程，據(jù)圖回答：

（1）在基因工程中，A表示             ，B表示                    。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，在構(gòu)建過程中需要的工具有             

                                 ，一個完整的基因表達(dá)載體至少包括哪些部分       

                                                    。

（3）在②過程中一般采用                 技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，一般選用山羊的           作為受體細(xì)胞，通常采用                      技術(shù)檢測外源基因是否插入了山羊的基因組，在研制乳腺生物反應(yīng)器時，應(yīng)使外源基因在小鼠的             細(xì)胞中特異表達(dá)。

（4）將目的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中一般是采用               方法，要確定目的基因?qū)�入成功后，是否能穩(wěn)定遺傳并表達(dá)，需進(jìn)行檢測和鑒定工作，請寫出在個體水平上的鑒定過程

                                                                         。

（7分）回答下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的問題：

（1）取胚胎或幼齡動物的器官或組織剪碎，分散成單個細(xì)胞，制成              ，放入培養(yǎng)瓶內(nèi)，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面相互接觸時，細(xì)胞會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的　　　　 　　　，這種培養(yǎng)稱為                ，要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來，需要用酶處理，可用的酶是　　　    　　　　。

（2）隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增多，絕大部分細(xì)胞分裂停止，進(jìn)而出現(xiàn)　　        　　現(xiàn)象；現(xiàn)用某種大分子染料，對細(xì)胞進(jìn)行染色時，觀察到死細(xì)胞被染色，而活細(xì)胞不染色，原因是　　　        　                      　　　　　。

（3）動物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等，與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是，還含有                       。

（5分）葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可以用下面的圖解簡單表示，根據(jù)圖解完成問題：

葉片

          ↓洗凈、滅菌、切條、酶解

原生質(zhì)體懸浮液

          ↓過濾、離心

純凈的原生質(zhì)體

          ↓DPD培養(yǎng)基中培養(yǎng)

愈傷組織

（1）圖解中“酶解”所用的酶應(yīng)該包括                               。

（2）原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)由                                       三部分組成。

（3）DPD培養(yǎng)基的成分中，除了各種營養(yǎng)成分外，還必須含有                    才能誘導(dǎo)獲得愈傷組織。

（4）獲得原生質(zhì)體后，需要對其活力進(jìn)行檢查，下列哪種實驗最適合?_________。

A.觀察原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)是否完整      B.觀察細(xì)胞質(zhì)流動

C.觀察細(xì)胞的有絲分裂              D.觀察葉綠體數(shù)目的多少

（5）一般在培養(yǎng)基上培養(yǎng)24～48小時后，大部分原生質(zhì)體已再生出細(xì)胞壁�？梢酝ㄟ^取樣，利用25%蔗糖溶液以及其他用具，通過                            實驗來鑒別細(xì)胞壁是否已經(jīng)再生。

（10分）右圖是某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答：

(1)該方案不能達(dá)到預(yù)期效果原因是：                                  。

(2)圖中②為              過程，常用                  作為誘導(dǎo)劑。

(3)圖中③表示用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，目的是                                 。

 (4)圖中④過程，能獲得足夠數(shù)量的雜交瘤細(xì)胞，便于大規(guī)模培養(yǎng)，該細(xì)胞既具有骨髓瘤細(xì)胞的               特點，又具備淋巴細(xì)胞的              特點，由該細(xì)胞產(chǎn)生的抗體稱為                    。該抗體與常規(guī)抗體相比，具有                  特點。

 (5)破傷風(fēng)桿菌的抗體最終可從                 和                 中提取。

（11分）現(xiàn)有A和B兩個肉牛品種，A品種牛的細(xì)胞組成可表示為A細(xì)胞核、A細(xì)胞質(zhì)，B品種牛則為B細(xì)胞核、B細(xì)胞質(zhì)。

（1）如果要獲得一頭克隆牛，使其細(xì)胞由A細(xì)胞核和B細(xì)胞質(zhì)組成，基本步驟是，從A品種牛體內(nèi)取出體細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)。然后再從培養(yǎng)細(xì)胞中取出            注入B品種牛的          卵母細(xì)胞，經(jīng)過某處刺激和培養(yǎng)后，可形成胚胎，該胚胎被稱為             ，將該胚胎移入代孕母牛的        中，通過培育可達(dá)到目的。

（2）克隆牛用到的生物技術(shù)有              、                   （寫出其中2種）

（3）克隆牛的產(chǎn)生說明                具有全能性。利用克隆技術(shù)培育良種牛時，如果多個供體細(xì)胞來自同一頭牛，培育出的多個牛犢個體在性狀上也不完全相同，分析其原因，下列正確的是         （多選）

A．性狀變異可由環(huán)境條件引起         

B．基因可能會發(fā)生突變

C．受體細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因不同         

D．細(xì)胞核基因發(fā)生了重組

（4）由A、B兩品種雜交得到的牛與克隆牛相比，雜交牛細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來自      個親本，細(xì)胞質(zhì)來自     性親本，克隆牛和雜交牛的遺傳物質(zhì)組成        （相同，不同）。

（11分）“白菜——甘藍(lán)”是用細(xì)胞工程的方法培育出來的蔬菜新品種，它具有生長期短和耐儲藏等優(yōu)點。下圖是“白菜——甘藍(lán)”的培育過程示意圖，他們的基因型分別為AaBB、ccDd，請回答下列問題：

（1）上述過程所利用的植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段有                          和

                                      。

（2）過程③的誘導(dǎo)方法有物理法和化學(xué)法兩大類過程。若用化學(xué)法，所用化學(xué)試劑名稱　　　       ，實際融合過程中原生質(zhì)體可能會形成        種融合細(xì)胞（只考慮兩個細(xì)胞融合的情況），請寫出雜種細(xì)胞的基因型                　

（3）白菜和甘藍(lán)細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是                       ，與此過程密切相關(guān)的細(xì)胞器是                。⑤過程中進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是               。

（4）已知白菜細(xì)胞中含2M條染色體，甘藍(lán)細(xì)胞中含有2N條染色體，則雜種植株體細(xì)胞染色體數(shù)為　　            。通常情況下，白菜和甘藍(lán)有性雜交是不能成功的，原因是　　　                   　   ，若對白菜和甘藍(lán)采用雜交育種方法能成功的話，得到的后代應(yīng)含                條染色體。

（6分）動物器官的體外培養(yǎng)技術(shù)對于研究器官的生理、病理過程及其機(jī)制意義重大。下圖是一個新生小鼠的肝臟小塊培養(yǎng)裝置示意圖。請回答下列問題。

(1)肝臟切成小薄片，這有利于肝臟細(xì)胞                                     。

(2)氣室中充入5％ C0₂氣體的主要作用是                                  。

(3)培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長，但要注意選擇抗生素的               ，以保證抗生素對肝臟無害。

(4)有機(jī)物X有毒性，可誘發(fā)染色體斷裂。利用上圖所示裝置和提供的下列材料用具，探究肝臟小塊對有機(jī)物X是否具有解毒作用。

材料用具：肝臟小塊，外周血淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液，植物凝集素(刺激淋巴細(xì)胞分裂)；顯微鏡，載玻片，蓋玻片，玻璃皿，滴管；吉姆薩染液(使染色體著色)，有機(jī)物X溶液等。

實驗過程：

①在淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中加入植物凝集素培養(yǎng)淋巴細(xì)胞，取4等份，備用。

②利用甲、乙、丙、丁4組上圖所示裝置，按下表步驟操作(“√”表示已完成的步驟)。

上表中還需進(jìn)行的操作是                                                。

③培養(yǎng)一段時間后，取4組裝置中的等量培養(yǎng)液，分別添加到4份備用的淋巴細(xì)胞培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。

④一段時間后取淋巴細(xì)胞分別染色、制片。在顯微鏡下觀察                       ，并對比分析。若丙組淋巴細(xì)胞出現(xiàn)異常，而甲組的淋巴細(xì)胞正常，則說明               。

下列有關(guān)細(xì)胞的敘述中，正確的是

A．內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與細(xì)胞膜中蛋白質(zhì)和磷脂等成分的更新有關(guān)

B．酵母菌細(xì)胞內(nèi)的mRNA只能在細(xì)胞核和線粒體中合成

C．處于分裂期的細(xì)胞不進(jìn)行DNA的復(fù)制和蛋白質(zhì)的合成

D．人體內(nèi)精細(xì)胞變成為精子的過程不屬于細(xì)胞分化的過程