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苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

A．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源

B．如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法

C．若圖中④為對照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一碳源

D．使用平板劃線法可以在⑥上獲得單菌落

下列四個(gè)選項(xiàng)中，肯定沒有采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)的一項(xiàng)是

A．花藥離體培養(yǎng)得到單倍體植株

B．秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗得到多倍體植株

C．基因工程培育的抗棉鈴蟲的棉花植株

D．細(xì)胞工程培育“番茄——馬鈴薯”雜種植株

動物細(xì)胞培養(yǎng)更需關(guān)注培養(yǎng)基的滲透壓，這是因?yàn)閯游锛?xì)胞

A．沒有細(xì)胞壁，對培養(yǎng)基的滲透壓更敏感

B．滲透壓遠(yuǎn)高于細(xì)菌或植物細(xì)胞的滲透壓

C．沒有成熟大液泡，滲透壓調(diào)節(jié)能力差

D．生長緩慢，各生長階段對環(huán)境的滲透壓要求不同

家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)�入家蠶細(xì)胞并大規(guī)模培

養(yǎng)，可提取干擾素用于制藥。

(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用________________酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。

(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的________和________之間。

(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴(kuò)增緩沖液(含Mg^2＋)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。

(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長的細(xì)胞會產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以________，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。

馬鈴薯是種植廣泛的農(nóng)作物，病毒侵染后導(dǎo)致產(chǎn)量大幅下降，培育脫毒和抗毒的馬鈴薯品種是提高產(chǎn)量的有效方法。請分析并回答。

(1)馬鈴薯莖尖病毒極少甚至無病毒，因此可將馬鈴薯莖尖接種在培養(yǎng)基中，培養(yǎng)基中添加生長素和細(xì)胞分裂素，誘導(dǎo)離體細(xì)胞經(jīng)過________和________完成組織培養(yǎng)過程，從而形成脫毒苗。此過程說明植物細(xì)胞具有________。

(2)為獲得抗病毒的馬鈴薯植株，往往采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)，將病毒復(fù)制酶基因轉(zhuǎn)移到馬鈴薯體內(nèi)。其過程大致如下圖所示。

①上述過程中，將目的基因?qū)�入馬鈴薯細(xì)胞使用了________法。該方法先將目的基因插入到農(nóng)桿菌的________上，然后通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插入到植物細(xì)胞的________上。導(dǎo)入農(nóng)桿菌時(shí)，首先要構(gòu)建基因表達(dá)載體，這里需要的工具有_________________，還要用________處理土壤農(nóng)桿菌，使之轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)，然后將它們在緩沖液中混合培養(yǎng)以完成轉(zhuǎn)化過程。

②該轉(zhuǎn)基因馬鈴薯產(chǎn)生的配子中________(填“一定”或“不一定”)含有目的基因。

閱讀如下材料，回答問題。

材料甲：科學(xué)家將牛生長激素基因?qū)�入小鼠受精卵中，得到了體型巨大的“超級小鼠”；科學(xué)家采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育出轉(zhuǎn)基因煙草。

材料乙：T₄溶菌酶在溫度較高時(shí)易失去活性，科學(xué)家對編碼T₄溶菌酶的基因進(jìn)行改造，使其表達(dá)的T₄溶菌酶的第3位的異亮氨酸變?yōu)榘腚装彼�，在該半胱氨酸與第97位的半胱氨酸之間形成了一個(gè)二硫鍵，提高了T₄溶菌酶的耐熱性。

材料丙：兔甲和兔乙是同一物種的兩個(gè)雌性個(gè)體，科學(xué)家將兔甲受精卵發(fā)育成的胚胎移植到兔乙的體內(nèi)，成功產(chǎn)出兔甲的后代，證實(shí)了同一物種的胚胎可在不同個(gè)體的體內(nèi)發(fā)育。

回答下列問題：

（1）材料甲屬于基因工程的范疇。將基因表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠的受精卵中常用          法。構(gòu)建基因表達(dá)載體常用的工具酶有          和              。

（2）材料乙屬于                工程范疇。該工程是指以分子生物學(xué)相關(guān)理論為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對            進(jìn)行改造，或制造制造一種              的技術(shù)。在該實(shí)例中，引起T₄溶菌酶空間結(jié)構(gòu)改變的原因是組成該酶肽鏈的              序列發(fā)生了改變。

（3）材料丙屬于胚胎工程的范疇。胚胎移植是指將獲得的早期胚胎移植到        種的、生理狀況相同的另一個(gè)雌性動物體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育成新個(gè)體的技術(shù)。在資料丙的實(shí)例中，兔甲稱為     體，兔乙稱為        體。

現(xiàn)有一生活污水凈化處理系統(tǒng)，處理流程為“厭氧沉淀池→曝氣池→兼氧池→植物池”，其中植物池中生活著水生植物、昆蟲、魚類、蛙類等生物。污水經(jīng)凈化處理后，可用于澆灌綠地�；卮饐栴}：

(1)污水流經(jīng)厭氧沉淀池、曝氣池和兼氧池后得到初步凈化。在這個(gè)過程中，微生物通過________呼吸將有機(jī)物分解。

(2)植物池中，水生植物、昆蟲、魚類、蛙類和底泥中的微生物共同組成了________(生態(tài)系統(tǒng)、群落、種群)。在植物池的食物網(wǎng)中，植物位于第________營養(yǎng)級。植物池中所有蛙類獲得的能量最終來源于________所固定的________能。

(3)生態(tài)工程所遵循的基本原理有整體性、協(xié)調(diào)與平衡、________和________等原理。

(4)一般來說，生態(tài)工程的主要任務(wù)是對________進(jìn)行修復(fù)，對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進(jìn)行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。

江蘇某農(nóng)戶創(chuàng)建的冬季生態(tài)型種植養(yǎng)殖模式如下圖所示，請據(jù)圖回答下列問題。

(1)牛棚內(nèi)產(chǎn)生的________可擴(kuò)散進(jìn)入蔬菜大棚，提高蔬菜的光合效率；蔬菜光合作用產(chǎn)生的________可擴(kuò)散進(jìn)入牛棚。

(2)秸稈除了作為牛的飼料外，還可與牛糞混合堆放進(jìn)行________，腐熟的產(chǎn)物肥效提高，這是因?yàn)開___________________。

這種肥料用于蔬菜栽培可以提高蔬菜產(chǎn)量。

(3)在牛的品系、飼料品種和用量不變的條件下，采用這種養(yǎng)殖模式，牛的生長速率明顯提高，其主要原因是____________________________________________________________。

(4)牛棚保溫所需的熱能來源于牛自身散熱、________和________。

(5)從生態(tài)系統(tǒng)主要功能的角度分析，這種種植養(yǎng)殖模式較好地實(shí)現(xiàn)了_____    ___________。

常見的釀酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖產(chǎn)生酒精但對酒精的耐受能力較差。下面是利用木糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精的釀酒酵母的培育過程，請分析回答下列問題。

(1)將自然界中采集到的葡萄帶回實(shí)驗(yàn)室，用________將葡萄皮上的微生物沖洗到無菌的三角瓶中，瓶中的液體經(jīng)適當(dāng)稀釋后，用________方法接種于固體培養(yǎng)基上，在適宜的條件下培養(yǎng)，獲得各種菌落。

(2)將培養(yǎng)基上的酵母菌菌株轉(zhuǎn)接到以木糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中，無氧條件下培養(yǎng)一周后，有些酵母菌死亡，說明這些酵母菌________。從存活的酵母菌提取DNA，并用PCR技術(shù)大量擴(kuò)增目的基因。

(3)將目的基因連接到一種穿梭質(zhì)粒(可以在大腸桿菌中復(fù)制和在釀酒酵母中表達(dá)的質(zhì)粒)上。該質(zhì)粒具有兩種標(biāo)記基因，即氨芐青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。大腸桿菌被該質(zhì)粒轉(zhuǎn)化后，應(yīng)接種于含________的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選。將質(zhì)粒導(dǎo)入酵母菌時(shí)，由于氨芐青霉素不能抑制酵母菌繁殖，應(yīng)選擇缺乏________能力的釀酒酵母作為受體菌。從細(xì)胞結(jié)構(gòu)看，酵母菌不同于大腸桿菌的主要特點(diǎn)是________。

(4)對轉(zhuǎn)基因釀酒酵母發(fā)酵能力進(jìn)行測試，結(jié)果如圖所示：

據(jù)圖分析，將轉(zhuǎn)基因釀酒酵母接種在以________為碳源的培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵能力測試，最初培養(yǎng)基中的________糖被快速消耗，隨著發(fā)酵繼續(xù)進(jìn)行，轉(zhuǎn)基因釀酒酵母能夠___________________，說明所需菌株培育成功。

利用不同微生物的發(fā)酵作用制作食品，歷史悠久。請分析回答下列問題。

(1)腐乳制作的流程是：讓豆腐上長出________→加鹽腌制→加鹵湯裝瓶→密封腌制。用鹽腌制時(shí)，應(yīng)注意控制________；配制鹵湯時(shí)，要使鹵湯中酒的含量控制在________%左右。

(2)制作泡菜的原理是_______________________________。

(3)蔬菜在腌制過程中，會產(chǎn)生亞硝酸鹽。在________條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生________反應(yīng)后，與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________色染料。將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行目測比較，估算出的亞硝酸鹽含量如圖曲線所示，據(jù)圖可以得出的結(jié)論是              ___________       ____                     ____ 。