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上海醫(yī)學(xué)遺傳研究所成功培育出第一頭攜帶人白蛋白基因的轉(zhuǎn)基因牛。他們還研究出一種可大大提高基因表達(dá)水平的新方法，使轉(zhuǎn)基因動物乳汁中的藥物蛋白含量提高了30多倍，標(biāo)志著我國轉(zhuǎn)基因研究向產(chǎn)業(yè)化的目標(biāo)又邁進(jìn)了一大步。以下與此有關(guān)的敘述中，正確的是（    ）

A．所謂“提高基因表達(dá)水平”是指設(shè)法使牛的乳腺細(xì)胞中含有更多的人白蛋白基因

B．可將白蛋白基因?qū)�入牛的卵�?xì)胞中，通過組織培養(yǎng)形成轉(zhuǎn)基因牛

C．人們只在轉(zhuǎn)基因牛的乳汁中才能獲取人白蛋白，是因?yàn)橹辉谵D(zhuǎn)基因牛的乳腺細(xì)胞中才有人白蛋白基因

D．運(yùn)用基因工程技術(shù)讓牛合成人白蛋白，該技術(shù)將導(dǎo)致定向變異

用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì)。下列敘述不正確的是（    ）

A．常用相同的限制性內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒

B．DNA連接酶和 RNA聚合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶

C．可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒

D．導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)

下列關(guān)于哺乳動物胚胎發(fā)育和胚胎工程的敘述，正確的是（    ）

A．體外受精完成后即可進(jìn)行胚胎移植操作

B．胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育全能性，它可發(fā)育成新個體

C．誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化成器官的培養(yǎng)基中不需要加入飼養(yǎng)層細(xì)胞

D．通過胚胎移植產(chǎn)生多個后代的繁殖方式都屬于有性生殖

對下圖所示粘性末端的說法正確的是（    ）

A．甲、乙、丙黏性末端是由兩種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的

B．圖乙中的酶切位點(diǎn)在A與G之間

C．如果甲中的G發(fā)生突變，限制性核酸內(nèi)切酶可能不能識別該切割位點(diǎn)

D．構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶分別作用于a處和b處

已知某種限制性內(nèi)切酶在一線性DNA分子上有3個酶切位點(diǎn)，如下圖中箭頭所指。如果該線性DNA分子在3個酶切位點(diǎn)上都被該酶切斷，則會產(chǎn)生a、b、c、d四種不同長度的DNA片段。現(xiàn)有多個上述線性DNA分子，若在每個DNA分子上至少有一個酶切位點(diǎn)被該酶切斷，則理論上講，經(jīng)該酶酶切后，這些線性DNA分子最多能產(chǎn)生長度不同的DNA片段種類數(shù)是（    ）

A．3                            B．4                   C．9                   D．12

基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒時，用同一種限制性內(nèi)切酶切割DNA，被水解的磷酸二酯鍵至少

A．2個          B．4個              C．6個              D．8個

現(xiàn)有一長度為3000堿基對（bp）的線性DNA分子，用限制性核酸內(nèi)切酶酶切后，進(jìn)行凝膠電泳，使降解產(chǎn)物分開。用酶H單獨(dú)酶切，結(jié)果如圖l。用酶B單獨(dú)酶切，結(jié)果如圖2。用酶H和酶B同時酶切，結(jié)果如圖3。該DNA分子的結(jié)構(gòu)及其酶切圖譜是（    ）

下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）及其識別序列和切割位點(diǎn)，由此推斷的以下說法

正確的是（    ）

（注：Y＝C或T，R＝A或G）

A．限制酶切割后不一定形成黏性末端         

B．限制酶的切割位點(diǎn)一定在識別序列的內(nèi)部

C．不同限制酶切割后一定形成不同的黏性末端 

D．一種限制酶一定只能識別一種核苷酸序列

（16分）玉米的光合效率較水稻的高，這與玉米中磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）有很大的關(guān)系。如何將玉米的這一種酶轉(zhuǎn)移到水稻等植物上一直是植物生物學(xué)家的研究課題之一。但實(shí)踐證明，常規(guī)雜交育種手段很難如愿以償。最近，有人利用土壤農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將完整的玉米PEPC基因?qū)�入到了水稻的基因組中，為快速改良水稻的光合作用效率，提高糧食作物產(chǎn)量開辟了新途徑。

（1）玉米和水稻很難利用常規(guī)雜交手段雜交是因?yàn)?u>                                     。

（2）獲得PEPC基因后，將其導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌的質(zhì)粒中，獲得重組質(zhì)粒需要的工具酶是          ，請?jiān)谙驴蛑醒a(bǔ)充某DNA片段并畫出切割形成黏性末端的過程示意圖。

（3）導(dǎo)入完成后得到的土壤農(nóng)桿菌，實(shí)際上只有少數(shù)導(dǎo)入了重組質(zhì)粒，可根據(jù)質(zhì)粒中含有的      篩選出成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌。

（4）用含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌感染水稻細(xì)胞，即使感染成功，PEPC基因通過一定途徑整合到水稻的基因組中，但不一定會表達(dá)，原因最可能是            。

A．玉米和水稻不共用一套密碼子   

B．水稻中缺乏合成PEPC的氨基酸

C．PEPC基因受到水稻基因組中相鄰基因的影響

D．整合到水稻基因組中的PEPC基因被水稻的某種酶破壞了

（5）PEPC基因在水稻細(xì)胞中成功表達(dá)的標(biāo)志是                                     。

如目的基因完成了表達(dá) ，則其表達(dá)過程可表示為                               。

（6）得到PEPC基因成功表達(dá)的水稻細(xì)胞后，科研人員常采用                 方法獲得轉(zhuǎn)基因水稻植株。

（13）根據(jù)細(xì)胞全能性理論，運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)對生物進(jìn)行無性生殖在生產(chǎn)上具有重大意義。

請回答下列有關(guān)問題：

Ⅰ．為保持某觀賞植物優(yōu)良的遺傳性狀，某科技小組利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)來進(jìn)行繁殖。他們將該植物的花芽分別培養(yǎng)在含有不同比例的吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素的培養(yǎng)基中，得到的花芽生長狀況如下表：

                          A組            B組            C組                D組                        E組

吲哚乙酸         0                  3ppm          3ppm              0.03ppm                0

細(xì)胞分裂素     0                  0.2ppm      0.002ppm      1.0ppm                  0.2ppm

花芽生

長狀況      仍是組織切塊  形成愈傷組織  愈傷組織分化出根   愈傷組織

分化出嫩枝     稍生長

①在此過程中能實(shí)現(xiàn)脫分化的花芽有那些組？                        

②從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可看出：吲哚乙酸和細(xì)胞分裂素是實(shí)驗(yàn)中的二種重要物質(zhì)。其中，新芽形成必須的條件是                                               ；而在培養(yǎng)形成完整新個體過程中的不同培養(yǎng)期，對它們的調(diào)控關(guān)鍵是                                                                 。

Ⅱ．我國植物學(xué)家將名貴蘭花的莖尖細(xì)胞放進(jìn)培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，最終發(fā)育成完整的新植株。下圖是細(xì)胞培養(yǎng)形成蘭花植株示意圖，請據(jù)圖回答：

(1)過程③和④要經(jīng)過              和                 。

(2)在培養(yǎng)過程中，除了提供水分、無機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸外，還需要在培養(yǎng)基中加入                 。同時，在培養(yǎng)過程中，除必要的溫度、光照和氧氣等外界條件外，成功的另一個關(guān)鍵是操作過程必須保證                       。

(3)從育種的角度來看。植物組織培養(yǎng)與有性繁殖相比，優(yōu)勢主要有(列舉兩條)          、             

(4)與植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基相比，用于動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)液除含有水分、無機(jī)鹽、糖類、維生素以及氨基酸等之外，通常還要添加                。