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質(zhì)粒是基因工程中最常用的載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。某細(xì)菌質(zhì)粒上的標(biāo)記基因如右圖所示，通過標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上生長情況也不同，下圖示外源基因在質(zhì)粒中可插入的位置有a、b、c點(diǎn)。

某同學(xué)根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象對其插入的位點(diǎn)進(jìn)行分析，其中分析正確的是

天然的玫瑰沒有藍(lán)色花，人們首先研究清楚了三色紫羅蘭的藍(lán)色素基因序列，并利用農(nóng)桿菌成功培育了轉(zhuǎn)基因藍(lán)玫瑰。下列敘述錯(cuò)誤的是

A．可用化學(xué)方法合成藍(lán)色素基因

B．一般根據(jù)藍(lán)色素基因表達(dá)結(jié)果篩選導(dǎo)入目的基因的農(nóng)桿菌

C．重組質(zhì)粒首先進(jìn)入農(nóng)桿菌，然后再進(jìn)入玫瑰細(xì)胞

D．轉(zhuǎn)基因藍(lán)玫瑰的培育過程需運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)

下圖為果酒和果醋的制作流程，回答問題：

（1）清洗葡萄時(shí)應(yīng)特別注意不能反復(fù)沖洗，以防止 。

（2）從自然菌樣中篩選較理想的醋酸桿菌進(jìn)行純化培養(yǎng)，通常采用 方法接種，接種之前要對接種工具進(jìn)行 ，避免接種工具上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基。

（3）果酒的制作離不開酵母菌，在酵母菌的酒精發(fā)酵過程中，通常將溫度控制在 。由果酒轉(zhuǎn)變成果醋的制作時(shí)，需要改變的環(huán)境條件是 和溫度控制住30～35℃。寫出由果酒釀制成果醋過程的總反應(yīng)式： 。

（4）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌 （填“能”或“不能”）將果汁中的糖發(fā)酵為醋酸，理由。 。

（5）在用果汁制果酒的過程中，發(fā)酵瓶溶液中pH的變化是 。

A．增大 B．不變 C．減小 D．先堿小后增大

下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點(diǎn)，圖l、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請回答下列問題：

（1）一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前、后，分別含有 、 個(gè)游離的磷酸基團(tuán)。

（2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越 。

（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是 。

（4）與只使用EcoR I相比較，使用BamHⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止 。

（5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入 酶，若兩兩相連，則連接產(chǎn)物中有哪幾種情況? 。

（6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了 。

（7）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在 的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測。

（輪狀病毒（RV）是引起嬰幼兒腹瀉的主要病原體之一，其主要感染小腸上皮細(xì)胞，從而造成細(xì)胞損傷，引起腹瀉。有專家指出物質(zhì)X可以預(yù)防輪狀病毒感染，為了驗(yàn)證物質(zhì)X的作用，研究者計(jì)劃用新生小白鼠做實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)材料：生長發(fā)育狀況相同的健康的出生3天的小白鼠30只。試驗(yàn)前大便輪狀病毒檢測為陰性。RV來源：RV流行高峰期腹瀉患兒。（注：給藥方式和給藥劑量不作具體要求。）

實(shí)驗(yàn)思路如下：

①取生長發(fā)育狀況相同的健康的小白鼠30只，隨機(jī)分成數(shù)量相等的三組，分別編號為甲、乙、丙。

② ，乙組和丙組每只小白鼠注射等量的生理鹽水。

③將甲、乙、丙三組小白鼠置于相同且適宜的條件下飼養(yǎng)。一段時(shí)間后， ，丙組不作處理。

④將甲、乙、丙三組小白鼠置于相同且適宜的條件下飼養(yǎng)。一段時(shí)間后，觀察并記錄小白鼠的患病情況，統(tǒng)計(jì)并分析各組小白鼠的患病率。

（1）完善上述實(shí)驗(yàn)思路。

（2）請?jiān)O(shè)計(jì)一張用于記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果的表格。（注：表格用于記錄每組的發(fā)病情況等，不記個(gè)體；表格名稱不作要求）

（3）請預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果并得出結(jié)論：

Ⅰ．轉(zhuǎn)基因克隆豬已在我國培育成功。研究組首先從豬胚胎皮膚細(xì)胞中分離出纖維細(xì)胞，進(jìn)行體外培養(yǎng)。通過電穿孔的方法將構(gòu)建好的基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)入纖維細(xì)胞，經(jīng)篩選后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞進(jìn)行體細(xì)胞克隆，再將重組胚胎移入代孕母豬子宮內(nèi)，最終獲得轉(zhuǎn)基因克隆豬。請回答：

（1）在對豬纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，需要在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的 ，以防止培養(yǎng)過程的污染。此外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止 對細(xì)胞自身造成危害。

（2）篩選轉(zhuǎn)基因細(xì)胞時(shí)，需要用到基因表達(dá)載體中的 。

（3）在進(jìn)行體細(xì)胞克隆前，先要從屠宰場收集豬卵巢，采集 ，并在體外培養(yǎng)成熟。然后將轉(zhuǎn)基因纖維細(xì)胞核注入 中，再經(jīng)過一系列過程獲得含有目的基因的重組胚胎。

（4）為了提高重組胚胎的利用率，可對處于 階段的胚胎進(jìn)行均等分割，再將重組胚胎移入代孕母豬子宮中繼續(xù)發(fā)育成轉(zhuǎn)基因克隆豬。一般地，代孕母豬需要用激素處理處理，促使其 以利于受孕。

Ⅱ．土壤中有些細(xì)菌含有脲酶，可通過降解尿素作為其生長的氮源�，F(xiàn)對土壤中的這類細(xì)菌進(jìn)行分離實(shí)驗(yàn)，請回答：

（1）分離培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)必須進(jìn)行無菌操作，包括培養(yǎng)基和各種器皿都必須是無菌的，常用的滅菌方法有

（至少答2種）。

（2）可用 法分離純化得到能降解尿素的菌種。在接種活菌的過程中，要在 旁進(jìn)行操作，接種后的培養(yǎng)皿 于37℃的 中培養(yǎng)。

（3）用含有酚紅指示劑的培養(yǎng)基篩選能分泌脲酶的細(xì)菌，若培養(yǎng)基中存在分解尿素的細(xì)菌，其菌落周圍會出現(xiàn)紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的 使PH升高，使酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，從而證明這一菌株以尿素為氮源。變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力 。

下列關(guān)于細(xì)胞的組成成分和結(jié)構(gòu)的敘述中，正確的是

A．維生素D和性激素都屬于脂肪類物質(zhì)

B．細(xì)胞合成的激素、抗體和神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)揮作用后都會失活

C．藍(lán)藻的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與了蛋白質(zhì)的加工

D．細(xì)胞核是DNA和RNA儲存和復(fù)制的主要場所

下列有關(guān)生物科學(xué)史的敘述中，正確的是

A．赫爾希和蔡斯用同位素標(biāo)記法證明了蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)

B．孟德爾運(yùn)用假說—演繹法揭示了分離定律和自由組合定律的實(shí)質(zhì)

C．薩頓利用類比推理法證明了基因在染色體上呈線性排列

D．沃森和克里克運(yùn)用了構(gòu)建物理模型的方法研究DNA分子的結(jié)構(gòu)