Question

在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。右圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：

（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟:目的基因的獲取、______、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、__________。
（2）A過程需要的酶有          和            。
（3）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用__________處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)開_________態(tài)；然后將          在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。
（4）含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過［C］_________________和［E］_________________。如要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入_________________。
（5）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是_____________。這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是_________________。

Answer 1

（12分）
（1）基因表達(dá)載體構(gòu)建 目的基因的檢測與鑒定
（2）限制酶     DNA連接酶 （3）Ca²⁺   感受    重組質(zhì)粒和感受細(xì)胞
（4）脫分化 再分化 卡那霉素 （5）目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA分子上   DNA分子雜交技術(shù)

解析試題分析：（1）基因工程的基本操作程序主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。
（2）構(gòu)建重組質(zhì)粒需要限制酶和DNA連接酶。
(3)如果受體細(xì)胞為細(xì)菌，需用Ca²⁺處理細(xì)菌，使細(xì)菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)，然后將重組質(zhì)粒和感受細(xì)胞放在緩沖液中完成轉(zhuǎn)化過程。
（4）離體植物組織需經(jīng)過[C]脫分化和[E]再分化過程培育成植株；由于質(zhì)粒上含卡那霉素抗性基因（kan），所以要確保再生植株含有抗蟲基因，需在培養(yǎng)基中加入卡那霉素進(jìn)行篩選。
（5）目的基因在棉花植株內(nèi)維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA分子上，需通過DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測。
考點(diǎn)：本題考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力。