Question

如圖為單克隆抗體制備流程示意圖．

（1）

 

技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)．
（2）細(xì)胞融合是隨機(jī)的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是

 

．在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機(jī)鹽，但要注意無機(jī)鹽的

 

，以保證生命活動的正常進(jìn)行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個細(xì)胞/mL，每孔滴入0.1mL細(xì)胞稀釋液，其目的是

 

．
（4）選出的雜交瘤細(xì)胞具備

 

特點(diǎn)．
（5）淋巴細(xì)胞是由動物體

 

中的

 

細(xì)胞分化、發(fā)育而．
（6）圖2表示從正常人和患者體內(nèi)獲取的P⁵³基因的部分區(qū)域．與正常人相比，患者在該區(qū)域的堿基會發(fā)生改變，已知限制酶E識別序列為CCGG，若用限制酶E分別完全切割正常人和患者的P⁵³基因部分區(qū)域（見圖2），那么正常人的會被切成

 

個片段，而患者的則被切割成長度為

 

對堿基的兩種片段．如果某人的P⁵³基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，那么該人的基因型是

 

（以P⁺表示正�；�因，Pⁿ表示異�；�因）

Answer 1

考點(diǎn)：單克隆抗體的制備過程,基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖1，將特定的抗原注射小鼠，篩選出產(chǎn)生抗體的淋巴細(xì)胞；與骨髓瘤細(xì)胞融合，轉(zhuǎn)移到HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，未融合的細(xì)胞死亡，而雜交瘤細(xì)胞存活；雜交瘤細(xì)胞分開培養(yǎng)，選育出產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞．
分析圖2，根據(jù)圖示及限制酶E識別序列為CCGG可知，因?yàn)檎�常人的該基因上有限制酶E和限制酶B的切割位點(diǎn)，正常人的會被切成3個片段；患者的限制酶E的酶切位點(diǎn)消失，只有限制酶B的酶切位點(diǎn)，所以該基因被切除兩段，長度為則被切割成長度為：290+170=460和220．

解答： 解：（1）單克隆抗體制備技術(shù)是動物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一，其基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)．
（2）細(xì)胞融合是隨機(jī)的過程，在HAT培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）．在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)液中需要添加無機(jī)鹽，但要注意無機(jī)鹽的種類和濃度，關(guān)注培養(yǎng)基的滲透壓和營養(yǎng)充沛，以保證生命活動的正常進(jìn)行．
（3）為選育出能產(chǎn)生高特異性抗體的細(xì)胞，要將從HAT培養(yǎng)基上篩選出的細(xì)胞稀釋到7～10個細(xì)胞/ml，每孔滴入0.1ml細(xì)胞稀釋液，其目的是使每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）．
（4）雜交瘤細(xì)胞具備骨髓瘤細(xì)胞在體外能大量增殖的特點(diǎn)，又具備B淋巴細(xì)胞能分泌特異性抗體的特點(diǎn)．
（5）淋巴細(xì)胞是骨髓中的造血干細(xì)胞分化、發(fā)育而來．
（6）由圖示及限制酶E識別序列為CCGG可知，正常人的會被切成3個片段，因?yàn)檎�常人的該基因上有限制酶E和限制酶B的切割位點(diǎn)，患者的限制酶E的酶切位點(diǎn)消失，只有限制酶B的酶切位點(diǎn)，所以該基因被切除兩段，長度為則被切割成長度為：290+170=460和220．如果某人的P⁵³基因部分區(qū)域經(jīng)限制酶E完全切割后，共出現(xiàn)170、220、290和460堿基對的四種片段，可知該人體內(nèi)的一對基因中一個是正常的，一個是突變的（異常基因），因此該人的基因型是P⁺Pⁿ．
故答案為：
（1）動物細(xì)胞培養(yǎng)
（2）篩選雜交瘤細(xì)胞   種類和數(shù)量（濃度）
（3）使每個孔內(nèi)不多于一個細(xì)胞，達(dá)到單克隆培養(yǎng)的目的（或單一細(xì)胞培養(yǎng)以保證抗體的純度）
（4）在體外大量增殖和分泌特異性抗體
（5）骨髓     造血干
（6）3      460、220      P⁺Pⁿ

點(diǎn)評：本題以圖形為載體，考查單克隆抗體的制備過程和基因工程知識，意在考查考生的識記能力和理解所學(xué)知識要點(diǎn)，把握知識間內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識，對生物學(xué)問題作出準(zhǔn)確的判斷．