Question

6．PCR技術(shù)有效地解決了因為樣品中DNA含量太低而難以對樣品進行研究的問題，而被廣泛應(yīng)用，此過程需要一種Taq DNA聚合酶．請回答有關(guān)問題：
（1）體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術(shù)中應(yīng)用高溫使DNA分子熱變性．
（2）Taq DNA聚合酶是從水生耐熱細(xì)菌Taq中分離的．
①Taq DNA聚合酶的功能是化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵．
②Taq DNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，可用凝膠色譜法和電泳法進行分離．
（3）相對于細(xì)菌分離，DNA分子的分離和提取操作要復(fù)雜的多．
①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，其目的分別是使血細(xì)胞破裂，釋放出DNA分子、稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出．
②實驗中能否以哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實驗材料？為什么？不能，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無DNA分子．
（4）與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較，PCR反應(yīng)要在一定的緩沖溶液中才能進行，并且要嚴(yán)格控制溫度條件．
（5）PCR中加入的引物有2種，加入引物的作用是作為DNA復(fù)制的起點．

Answer 1

分析 PCR技術(shù)：
1、概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)．
2、原理：DNA復(fù)制．
3、前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物．
4、條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）．
5、過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動解開．

解答 解：（1）體內(nèi)DNA復(fù)制過程中用解旋酶打開雙鏈DNA，而PCR技術(shù)中應(yīng)用 高溫使DNA分子熱變性．
（2）①Taq DNA聚合酶的功能是催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵．
②TaqDNA聚合酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，可用凝膠色譜法和電泳法進行分離．
（3）①在DNA提取中兩次用到蒸餾水，第一次的目的是使血細(xì)胞吸水破裂，釋放出DNA分子、第二次是稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出．
②實驗中不能以哺乳動物成熟的紅細(xì)胞為實驗材料，原因是哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無DNA分子．
（4）與體內(nèi)DNA復(fù)制相比較，PCR反應(yīng)要在一定的緩沖溶液中才能進行，并且要嚴(yán)格控制溫度條件．
（5）PCR中加入的引物有2種，加入引物的作用是作為DNA復(fù)制的起點．
故答案為：
（1）高溫使DNA分子熱變性　
（2）①催化脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵　
②凝膠色譜　電泳　
（3）①使血細(xì)胞破裂，釋放出DNA分子　稀釋NaCl溶液，使DNA分子析出　
②不能，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中無DNA分子　
（4）一定的緩沖溶液　溫度　
（5）2　作為DNA復(fù)制的起點

點評 本題考查PCR技術(shù)的相關(guān)知識，要求考生識記PCR技術(shù)的概念、原理、條件及過程，能與體內(nèi)DNA復(fù)制進行比較，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確判斷各選項，屬于考綱識記和理解層次的考查．