Question

下面是利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素的有關(guān)問題，請回答：

（1）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素必須應(yīng)用____________和___________等工程學(xué)手段。

（2）為了獲得人的胰島素基因通常采用________________________________的方法，

（3）大腸桿菌質(zhì)粒經(jīng)EcoRI（一種限制性核酸內(nèi)切酶）切割后所形成的黏性末端之一是

，則EcoRI的識別序列和切點是___________（切點用箭頭標在序列上）。

（4）要將人的胰島素基因插入上述質(zhì)粒切口形成重組質(zhì)粒必須利用的工具酶是__         _。

Answer 1

（1）基因工程     發(fā)酵工程

（2）人工合成基因（或根據(jù)人胰島素的氨基酸序列，人工合成胰島素基因）

（3）—G^↓GATCC—     （4）EcoRI和DNA連接酶

解析:

（1）利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素必須首先在大腸桿菌內(nèi)導(dǎo)入人的胰島素基因（基因工程），然后將轉(zhuǎn)基因大腸桿菌進行大量培養(yǎng)（發(fā)酵工程）

（2）人的胰島素基因是真核生物的基因，在實踐中常用人工合成的方法（或根據(jù)人胰島素的氨基酸序列，人工合成胰島素基因）合成。

（3）EcoRI（一種限制性核酸內(nèi)切酶）識別序列和切點是—G^↓GATCC—    

（4）在轉(zhuǎn)基因工程構(gòu)建重組基因時，除了用限制酶來提取目的基因外，還用同一種限制性內(nèi)切酶（EcoRI——切割質(zhì)粒，暴露出相同的黏性末端，再用DNA連接酶連接。