Question

如圖表示利用基因工程培育抗蟲棉的過程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列有關(guān)問題：

（1）若限制酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-，限制酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，那么在①過程中，應(yīng)用限制酶

 

切割質(zhì)粒，用限制酶

 

切割抗蟲基因．①過程在

 

（體內(nèi)/體外）進(jìn)行．
（2）將通過②過程得到的大腸桿菌涂布在含有

 

的培養(yǎng)基上，能夠生長說明已導(dǎo)入了普通質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，反之則說明沒有導(dǎo)入．
（3）重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是

 

．
（4）為使③此過程順利進(jìn)行，一般需將土壤農(nóng)桿菌用

 

　處理，作用是

 

_．
（5）⑤過程所用技術(shù)稱為

 

，從遺傳學(xué)角度來看，根本原因是根細(xì)胞具有

 

．
（6）此目的基因在根細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的標(biāo)志是

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，②表示將目的基因?qū)�入大腸桿菌，③表示將目的基因?qū)�入土壤農(nóng)桿菌，④表示將目的基因?qū)�入植物的根�?xì)胞，⑤表示通過植物組織培養(yǎng)獲得完成植株．

解答： 解：（1）質(zhì)粒上的兩個(gè)標(biāo)記基因中均有限制酶Ⅰ（-↓GATC-）的識(shí)別序列和切點(diǎn)，若用該酶切割會(huì)導(dǎo)致兩個(gè)抗性基因均被破壞，因此應(yīng)用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒；目的基因可以用限制酶Ⅰ或兩種酶一起切割，由于兩種切割形成的末端序列相同，因此可以連接．①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程在生物體外進(jìn)行．
（2）用限制酶Ⅱ切割質(zhì)粒時(shí)，破壞了質(zhì)粒中的氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環(huán)素抗性基因，所以可以含有四環(huán)素的培養(yǎng)基來進(jìn)行篩選．
（3）由于大腸桿菌的繁殖快，周期短，因此將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌可以擴(kuò)增目的基因．
（4）將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞時(shí)，常采用感受態(tài)細(xì)胞法，即用氯化鈣溶液處理細(xì)菌細(xì)胞，以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，使之成為容易吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細(xì)胞．
（5）要將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因植株，需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)，該技術(shù)的原理是細(xì)胞具有全能性，而細(xì)胞具有全能性的原因細(xì)胞中含有發(fā)育成完整個(gè)體的全部遺傳物質(zhì)．
（6）此目的基因在根細(xì)胞內(nèi)成功表達(dá)的標(biāo)志是形成目的基因產(chǎn)物．
故答案為：
（1）ⅡⅠ（Ⅱ和Ⅰ）  體外
（2）四環(huán)素  
（3）大量復(fù)制目的基因
（4）氯化鈣溶液   以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性
（5）植物組織培養(yǎng)   發(fā)育成完整個(gè)體的全部遺傳物質(zhì)
（6）形成目的基因產(chǎn)物

點(diǎn)評(píng)：本題結(jié)合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的具體操作步驟及相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理、過程及相關(guān)應(yīng)用，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的含義，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)答題．