Question

如圖是將動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生“工程菌”的示意圖．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）在“工程菌”細(xì)胞內(nèi)，控制細(xì)菌合成胰島素的基因、控制細(xì)菌主要性狀的基因依次存在于

 

、

 

上．
（2）在構(gòu)建重組運(yùn)載體B的過(guò)程中，需要

 

種限制酶切割

 

個(gè)磷酸二酯鍵．
（3）將重組DNA分子導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞，常用方法是

 

．
（4）在該工程中限制酶能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是一G^↓GATCC一，請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被切割形成的黏性末端．

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專(zhuān)題：

分析：1、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法．標(biāo)記基因的作用是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來(lái)．
2、分析題圖：圖示是將動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌細(xì)胞內(nèi)，產(chǎn)生“工程菌”的過(guò)程，其中A表示動(dòng)物的生長(zhǎng)激素基因，B表示基因表達(dá)載體．

解答： 解：（1）在“工程菌”細(xì)胞內(nèi)，控制細(xì)菌合成胰島素的基因存在于重組質(zhì)粒上，控制細(xì)菌主要性狀的基因存在于核區(qū)大型環(huán)狀DNA上．
（2）切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段可用同種限制酶，以產(chǎn)生相同的黏性末端．獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次，切割4個(gè)磷酸二酯鍵，切割質(zhì)粒需限制酶剪切一次，切割2個(gè)磷酸二酯鍵．因此在構(gòu)建重組運(yùn)載體B的過(guò)程中，需要同（一）種限制酶切割6個(gè)磷酸二酯鍵．
（3）將重組DNA分子導(dǎo)入細(xì)菌細(xì)胞，常用方法是鈣離子處理，增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性，使細(xì)菌變成感受態(tài)細(xì)胞．
（4）在該工程中限制酶能識(shí)別的序列和切點(diǎn)是一G^↓GATCC一，則質(zhì)粒被切割形成的黏性末端為．
故答案為：
（1）重組質(zhì)粒            核區(qū)大型環(huán)狀DNA
（2）同（一）             6
（3）鈣離子
（4）（見(jiàn)右圖）

點(diǎn)評(píng)：本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或的能力．要注意，獲取目的基因和切割載體時(shí)使用同種限制酶，目的是產(chǎn)生相同的黏性末端．獲取一個(gè)目的基因需限制酶剪切兩次，共產(chǎn)生 4個(gè)黏性末端或平末端．限制酶切割位點(diǎn)的選擇必須保證標(biāo)記基因的完整性，以便于檢測(cè)．