Question

9．2014年11月14日，第三軍醫(yī)大援利醫(yī)療隊(duì)從北京出發(fā)前往利比亞，幫助防控埃博拉疫情，埃博拉病毒（EBO）呈纖維狀，是一種烈性的、泛嗜性的RNA病毒，它首先破壞吞噬細(xì)胞，其次是肝、脾等細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致血管通透性增加，出現(xiàn)嚴(yán)重的出血熱現(xiàn)象，EBO衣殼上的包膜蛋白能被宿主細(xì)胞強(qiáng)烈識(shí)別，請(qǐng)回答下列相關(guān)問(wèn)題：
（1）人體感染EBO后，血液中可檢測(cè)到相應(yīng)抗體，抗體由漿細(xì)胞產(chǎn)生，但感染者的血清中很難形成高濃度的抗體，這是因?yàn)椴《厩秩静⑵茐木奘杉?xì)胞，影響抗原呈遞，阻斷了體液免疫的發(fā)生．
（2）EBO基因組為單股負(fù)鏈RNA，負(fù)鏈RNA的互補(bǔ)鏈才能與核糖體結(jié)合，進(jìn)而翻譯出蛋白質(zhì)，該過(guò)程是否符合遺傳信息傳遞的中心法則？是（填“是”或“否”）．
（3）當(dāng)前研發(fā)抗EBO的疫苗仍是主要的預(yù)防手段，圖1表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)EBO蛋白疫苗的基本過(guò)程，圖2中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨芐青霉素抗性基因，ori是質(zhì)粒的復(fù)制子，限制酶BamHⅠ、HindⅡ、PstⅠ、BgLⅡ作用位點(diǎn)如圖3．
①圖1中的目的基因是包裹蛋白基因，此方法制備的疫苗比直接利用病毒研制疫苗的方法更安全，其原因是蛋白質(zhì)不具侵染性，不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)．
②要能在大腸桿菌中不斷表達(dá)目的基因，同時(shí)又能提高重組效率，選擇的限制酶是BglII、BamHI．
③要篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，并準(zhǔn)確定位所需大腸桿菌的菌落，實(shí)驗(yàn)室至少需要兩種培養(yǎng)基，他們分別是只含兩種抗生素的培養(yǎng)基和只含新霉素的培養(yǎng)基兩種培養(yǎng)基．

Answer 1

分析 分析題圖：
圖1：圖1表示轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)EBO蛋白疫苗與重組病毒粒子疫苗的基本過(guò)程．
圖2：圖6是質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖，其中neo是新霉素抗性基因，amp表示氨芐青霉素抗性基因，ori是質(zhì)粒的復(fù)制子，該質(zhì)粒中有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ的作用位點(diǎn)．
圖3：圖3是含有目的基因的外源DNA分子．

解答 解：（1）抗體是由漿細(xì)胞分泌的，由于病毒侵染并破壞巨噬細(xì)胞，影響抗原呈遞，阻斷了體液免疫的發(fā)生，所以感染者的血清中很難形成高濃度的抗體．
（2）EBO基因組為單股負(fù)鏈RNA，負(fù)鏈RNA的互補(bǔ)鏈才能與核糖體結(jié)合，進(jìn)而翻譯出蛋白質(zhì)，說(shuō)明該過(guò)程符合遺傳信息傳遞的中心法則，EBO基因在人體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)蛋白質(zhì)的過(guò)程是：RNA→RNA→蛋白質(zhì)．
（3）①根據(jù)題干信息和圖1可知該基因工程的目的基因是包裹蛋白基因，通過(guò)該過(guò)程合成的蛋白質(zhì)不具侵染性，不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，所以比直接利用病毒研制疫苗的方法更安全．
②質(zhì)粒中含有限制酶BamHⅠ、HindⅢ、PstⅠ、BglⅡ作用位點(diǎn)，但若用限制酶HindⅢ切割會(huì)破壞目的基因，若用限制酶PstⅠ切割會(huì)破壞復(fù)制子，因此，要能在大腸桿菌中不斷表達(dá)目的基因，同時(shí)又能提高重組效率，選擇的限制酶是BglII、BamHI．
③用限制酶BglII、BamHI切割會(huì)破壞氨芐青霉素抗性基因，但不會(huì)破壞新霉素抗性基因，因此要篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，并準(zhǔn)確定位所需大腸桿菌的菌落，實(shí)驗(yàn)室至少需要兩種培養(yǎng)基，他們分別是含兩種抗生素的培養(yǎng)基和只含新霉素的培養(yǎng)基．
故答案為：
（1）漿細(xì)胞    病毒侵染并破壞巨噬細(xì)胞，影響抗原呈遞，阻斷了體液免疫的發(fā)生
（2）是
（3）①包裹蛋白基因 蛋白質(zhì)不具侵染性，不會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)
②BglII、BamHI
③只含兩種抗生素的培養(yǎng)基和只含新霉素的培養(yǎng)基

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作工具、操作步驟，掌握各步驟的相關(guān)細(xì)節(jié)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，能結(jié)合圖中和題中信息準(zhǔn)確答題，綜合性較強(qiáng)，有一定難度．