Question

用³²P標(biāo)記的噬菌體侵染大腸桿菌，在理論上，上清液中不含放射性，下層沉淀物中具有很高的放射性，而實驗的實際結(jié)果顯示：在離心的上清液中，也具有一定的放射性，而下層的放射性強度比理論值略低。

(1)在理論上，上清液放射性應(yīng)該為0，其原因是______________________________。

(2)由于實驗數(shù)據(jù)和理論數(shù)據(jù)之間有較大的誤差，請你對實驗過程進(jìn)行誤差分析：

a．在實驗中，從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機分離，這一段時間如果過長，會使上清液的放射性含量________，其原因是____________________________________________________________________。

b．在實驗中，如果有一部分噬菌體沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，是否有誤差的來源呢？________，請簡述理由：

________________________________________________________________________。

(3)請設(shè)計一個方法，來大量制備用³²P標(biāo)記的噬菌體。

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

 

Answer 1

(1)噬菌體已將含³²P的DNA全部注入到大腸桿菌內(nèi)

(2)升高　噬菌體在大腸桿菌內(nèi)增殖后釋放出來，經(jīng)離心后分布于上清液中　有　沒有侵染到大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的噬菌體經(jīng)離心后分布于上清液，使上清液出現(xiàn)放射性

(3)先用³²P標(biāo)記大腸桿菌，再用未標(biāo)記的噬菌體去侵染被³²P標(biāo)記的大腸桿菌，可大量獲得被³²P標(biāo)記的噬菌體

 

(1)噬菌體侵染大腸桿菌時，只將其DNA注入，蛋白質(zhì)未進(jìn)入，由于P幾乎都在DNA中，因此從理論上分析，上清液中應(yīng)無³²P。(2)實驗中，如果從噬菌體和大腸桿菌混合培養(yǎng)到用離心機分離的時間過長，就會有大腸桿菌裂解而釋放出子代噬菌體使上清液中放射性含量升高；如果有部分被標(biāo)記的噬菌體沒有侵染到大腸桿菌內(nèi)，離心后這部分噬菌體就分布在上清液中而使其帶有放射性。(3)噬菌體是專門寄生在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的，因此要制備大量的用³²P標(biāo)記的噬菌體，應(yīng)先用含³²P的培養(yǎng)基培養(yǎng)其宿主——大腸桿菌，再讓噬菌體侵染被³²P標(biāo)記的大腸桿菌即可。