Question

9．線粒體是與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)的細(xì)胞器．為研究蛋白B對(duì)家蠶細(xì)胞凋亡的影響，科研人員做了如下實(shí)驗(yàn)．
（1）細(xì)胞色素c是線粒體內(nèi)膜上的重要電子傳遞體，參與有氧呼吸第三階段的生化反應(yīng)．細(xì)胞受到凋亡信號(hào)的作用后，線粒體膜上的非特異性通道打開(kāi)，引起線粒體膜的（離子）通透性發(fā)生改變，線粒體膜兩側(cè)離子（和質(zhì)子）的分布發(fā)生變化，導(dǎo)致線粒體膜電位下降或消失，使得細(xì)胞色素c 釋放出來(lái)，引發(fā)細(xì)胞凋亡．
（2）用生物堿H處理懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞，處理不同時(shí)間后，用凝膠電泳方法測(cè)定細(xì)胞溶膠（細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）中細(xì)胞色素c的含量，結(jié)果如圖所示．

①由于細(xì)胞中微管蛋白的表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定（且豐富），在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以校準(zhǔn)和消除由于細(xì)胞培養(yǎng)操作、細(xì)胞取樣量和細(xì)胞色素c的檢測(cè)方法等無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響．
②據(jù)圖分析，正常細(xì)胞的細(xì)胞溶膠中沒(méi)有（或“未能”）檢測(cè)到細(xì)胞色素c，由細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c含量增加，分離的線粒體中細(xì)胞色素c含量下降判斷，隨著生物堿H 處理時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞色素c逐漸釋放到細(xì)胞溶膠中．
（3）為研究蛋白B的功能，科研人員構(gòu)建蛋白B基因過(guò)量表達(dá)載體和蛋白B基因表達(dá)干擾載體，導(dǎo)人懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞中，用生物堿H處理轉(zhuǎn)基因家蠶細(xì)胞，檢測(cè)到過(guò)量表達(dá)蛋白B的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量減少，抑制蛋白B基因表達(dá)的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量顯著增加，推測(cè)蛋白B抑制細(xì)胞色素c的釋放，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡．

Answer 1

分析 1、有氧呼吸的過(guò)程中，催化[H]氧化為H₂O的過(guò)程是有氧呼吸的第三階段，其場(chǎng)所是線粒體內(nèi)膜．
2、變量：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可以變化的因素稱為變量，包括自變量、因變量和無(wú)關(guān)變量；自變量是想研究且可人為改變的變量稱為自變量；因變量是隨著自變量的變化而變化的變量稱為因變量； 無(wú)關(guān)變量是在實(shí)驗(yàn)中，除了自變量外，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存在一些可變因素，能對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，這些變量稱為無(wú)關(guān)變量．
3、基因工程的基本操作步驟主要包括目的基因的獲取→基因表達(dá)載體的構(gòu)建→將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞→目的基因的檢測(cè)與鑒定四步．

解答 解：（1）有氧呼吸第三階段的場(chǎng)所是線粒體內(nèi)膜，由細(xì)胞色素c是線粒體內(nèi)膜上的重要電子傳遞體，可推測(cè)細(xì)胞色素c參與有氧呼吸第三階段的生化反應(yīng)；細(xì)胞受到凋亡信號(hào)的作用后，線粒體膜上的非特異性通道打開(kāi)，會(huì)引起線粒體膜的（離子）通透性發(fā)生改變，線粒體膜兩側(cè)離子（和質(zhì)子）的分布發(fā)生變化，導(dǎo)致線粒體膜電位下降或消失，使得細(xì)胞色素c 釋放出來(lái)，引發(fā)細(xì)胞凋亡．
（2）①在用生物堿H處理懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞，處理不同時(shí)間后，用凝膠電泳方法測(cè)定細(xì)胞溶膠（細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)）中細(xì)胞色素c的含量的實(shí)驗(yàn)中，由于細(xì)胞中微管蛋白的表達(dá)量相對(duì)穩(wěn)定（且豐富），所以在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，以校準(zhǔn)和消除由于細(xì)胞培養(yǎng)操作、細(xì)胞取樣量和細(xì)胞色素c的檢測(cè)方法等無(wú)關(guān)變量對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響．
②分析題圖可知，正常細(xì)胞的細(xì)胞溶膠中沒(méi)有（或“未能”）檢測(cè)到細(xì)胞色素c，而據(jù)細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c含量增加，分離的線粒體中細(xì)胞色素c含量下降可判斷，隨著生物堿H處理時(shí)間延長(zhǎng)，細(xì)胞色素c逐漸釋放到細(xì)胞溶膠中．
（3）為研究蛋白B的功能，科研人員構(gòu)建蛋白B基因過(guò)量表達(dá)載體和蛋白B基因表達(dá)干擾載體，導(dǎo)人懸浮培養(yǎng)的家蠶細(xì)胞中，用生物堿H處理轉(zhuǎn)基因家蠶細(xì)胞，檢測(cè)到過(guò)量表達(dá)蛋白B的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量減少，而抑制蛋白B基因表達(dá)的細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c的釋放量會(huì)顯著增加，據(jù)此可推測(cè)蛋白B抑制細(xì)胞色素c的釋放，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡．
故答案為：
（1）三    （離子）通透    離子（和質(zhì)子）
（2）①相對(duì)穩(wěn)定（且豐富）    檢測(cè)方法   
②沒(méi)有（或“未能”）    細(xì)胞溶膠中細(xì)胞色素c含量增加，分離的線粒體中細(xì)胞色素c含量下降
（3）生物堿H    抑制細(xì)胞色素c的釋放，進(jìn)而抑制細(xì)胞凋亡

點(diǎn)評(píng) 本題以為了研究蛋白B對(duì)家蠶細(xì)胞凋亡的影響，科研人員所作的實(shí)驗(yàn)為題材，考查細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能、基因工程操作步驟等知識(shí)，考生識(shí)記細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能、明確基因工程的操作步驟是解題的關(guān)鍵．