Question

(6分)科研人員為探究誘導(dǎo)酵母原生質(zhì)體攝取蠶豆葉綠體的適宜條件，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。
① 提取蠶豆葉綠體：過(guò)濾蠶豆新鮮葉片研磨液，對(duì)濾液進(jìn)行_A_后獲得葉綠體，加入2 mL 0.35 mol·L^－1氯化鈉溶液，制成懸浮液。
② 制備酵母原生質(zhì)體：在適宜條件下用2%的蝸牛酶處理酵母菌，獲得酵母原生質(zhì)體。
③ 誘導(dǎo)酵母原生質(zhì)體攝取蠶豆葉綠體：將酵母原生質(zhì)體與蠶豆葉綠體混和后，在不同溫度和pH下用聚乙二醇(PEG)處理60 min后洗滌。用顯微鏡觀察，結(jié)果如下表：

實(shí)驗(yàn)組別	溫度	pH	酵母原生質(zhì)體數(shù)/mL	含葉綠體的酵母原生質(zhì)體數(shù)/mL
1	30℃	7.6	760	4
2	37℃	7.6	1 100	7
3	37℃	6.0	1 250	5
4	37℃	10.2	990	3

請(qǐng)回答：
(1)補(bǔ)全實(shí)驗(yàn)步驟：A ________________________。
(2)步驟①中加入0.35 mol·L^－1氯化鈉的作用是________________________。
(3)步驟②中蝸牛酶的作用是除去酵母細(xì)胞的________________。
(4)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明酵母原生質(zhì)體攝取蠶豆葉綠體較適宜條件是________________。在適宜溫度下，酵母原生質(zhì)體容易攝入葉綠體與細(xì)胞膜的______________增強(qiáng)有關(guān)。

Answer 1

(6分)(1)(差速)離心　   (2)維持葉綠體的正常形態(tài)(防止葉綠體吸水脹破)
(3)細(xì)胞壁    (4)溫度為37℃，pH為7.6(2分)　流動(dòng)性

解析試題分析：
解析：（1）由于酵母原生質(zhì)體失去了細(xì)胞壁的保護(hù)而容易吸水脹破，因此，需要選擇等滲（或略高滲）溶液（0.35mol/L NaCl溶液）保存原生質(zhì)體，以保持原生質(zhì)體的正常形態(tài)和活性。（2）當(dāng)酵母原生質(zhì)體成功攝取葉綠體后，可以在光學(xué)顯微鏡下觀察到原生質(zhì)體中有綠色顆粒（葉綠體）。（3）葉綠體是光合作用的場(chǎng)所，若葉綠體能在酵母原生質(zhì)體中正常代謝，則該酵母原生質(zhì)體就可能會(huì)由原先的異養(yǎng)轉(zhuǎn)變?yōu)樽责B(yǎng)，最終培育的酵母細(xì)胞就可因能自養(yǎng)而獨(dú)立生活。
評(píng)講中還可進(jìn)行適當(dāng)延伸，如當(dāng)酵母原生質(zhì)體成功攝取葉綠體后，酵母原生質(zhì)體長(zhǎng)出新細(xì)胞壁的時(shí)期、如何確定葉綠體能否在酵母菌細(xì)胞中長(zhǎng)期存在并傳遞給后代等，以拓展學(xué)生的思維。
考點(diǎn)：本題以“酵母原生質(zhì)體攝取葉綠體的條件研究”為背景，考查原生質(zhì)體及葉綠體的制備方法、誘導(dǎo)生物膜融合的方法及原理，以及相關(guān)實(shí)驗(yàn)分析能力。