Question

4．Rag2基因（核基因重組激活基因）缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞，從而導致先天性免疫缺陷．科研人員利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行如下圖所示的基因治療．其技術(shù)流程如圖：

（1）動物細胞培養(yǎng)時培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO₂，CO₂的主要作用是．培養(yǎng)過程中應定期更換培養(yǎng)液，以便去除代謝產(chǎn)物，防止其積累對細胞造成危害．
（2）進行核移植的供體細胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞，其原因是10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型．
（3）進行步驟①時，卵母細胞需發(fā)育到MⅡ中期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞，在此之后的發(fā)育過程中，還可以從原始性腺中分離出ES細胞．
（4）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細胞經(jīng)過如上圖流程獲得的造血干細胞對小鼠進行治療，其好處是可以避免免疫排斥反應．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示是利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag₂基因缺失小鼠進行基因治療的過程圖解，其中①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過程，③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細胞．

解答 解：（1）動物細胞培養(yǎng)時培養(yǎng)箱中常加入95%和5%的CO₂，CO₂的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH．培養(yǎng)過程中應定期更換培養(yǎng)液，以便去除代謝產(chǎn)物，防止其積累對細胞造成危害．
（2）進行核移植的供體細胞一般用培養(yǎng)10代以內(nèi)的細胞，其原因是10代以內(nèi)的細胞能保持正常的二倍體核型．
（3）進行步驟①時，卵母細胞需發(fā)育到MⅡ中期；步驟②中，重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時，可從其內(nèi)細胞團分離出ES細胞，在此之后的發(fā)育過程中，還可以從原始性腺中分離出ES細胞．
（3）選用Rag2基因缺失小鼠自身的體細胞經(jīng)過如上圖流程獲得的造血干細胞對小鼠進行治療，其好處是可以避免免疫排斥反應．
故答案為：
（1）維持培養(yǎng)液的pH        去除代謝產(chǎn)物
（2）能保持正常的二倍體核型
（3）MⅡ中          囊胚            內(nèi)細胞團           原始性腺
（3）免疫排斥反應

點評 本題結(jié)合圖解，綜合考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)問題；識記核移植的具體過程；識記體外受精的具體過程及早期胚胎發(fā)育的過程，能結(jié)合所學的知識準確答題．