Question

6．分析有關基因工程的資料，回答問題．
如圖為構建某重組質粒的過程示意圖．lacZ基因可使細菌利用加入培養(yǎng)基的物質X-gal，從而使菌落顯現(xiàn)出藍色，若無該基因，菌落則成白色．圖中甲--戊DNA片段只注明了黏性末端處的堿基種類，其它堿基的種類未作注明．

（1）若酶M特異性識別的DNA堿基序列是，則酶N特異性識別的DNA堿基序列是．
（2）過程②是將所有片段混合在一起，用DNA連接酶拼接可得到不同的重組DNA．
（3）如果只考慮2個片段的組合，那么甲、乙、丁三個片段中能夠形成環(huán)狀DNA的片段組合是ABCDEF．（多選）
A．甲和乙   B．甲和甲    C．甲和丁    D．乙和乙    E．乙和丁     F．丁和丁
（4）為了篩選含重組質粒的受體菌，應在通用培養(yǎng)基中額外加入青霉素和X-gal，培養(yǎng)一段時間，挑選出白色的菌落進一步培養(yǎng)．原來質粒中，限制酶M和N的酶切位點應該位于D．
A．M位于青霉素抗性基因中，N位于lacZ基因中
B．N位于青霉素抗性基因中，M位于lacZ基因中
C．M和N都位于青霉素抗性基因中
D．M和N都位于lacZ基因中
（5）上述目的基因能夠在受體細菌中表達，其原因是不同生物D．
A．共用一套DNA     B．共用一套RNA     C．共用一套蛋白質    D．共用一套密碼子．

Answer 1

分析 1、切割DNA的工具是限制性核酸內切酶，又稱限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列．
2、質粒經過酶M和酶N的切割形成甲、乙片段，根據(jù)甲、乙片段的黏性末端可知，兩種限制酶的識別序列分布是、，酶M特異性識別的DNA堿基序列是，則酶N特異性識別的DNA堿基序列是．

解答 解：（1）由以上分析可知，酶N特異性識別的DNA堿基序列是．
（2）DNA連接酶可以將具有相同黏性末端的DNA片段連接起來．
（3）甲、乙、丁都有兩個黏性末端，且都相同，因此如果只考慮2個片段的組合，那么甲、乙、丁三個片段中任意兩個連接都能夠連接形成環(huán)狀DNA．
（4）為了篩選含重組質粒的受體菌，應在通用培養(yǎng)基中額外加入青霉素和X-gal，培養(yǎng)一段時間，挑選出白色的菌落進一步培養(yǎng)．這表明青霉素抗性基因沒有被破壞，lacZ基因已經被破壞，因此在原來質粒中，限制酶M和N的酶切位點都位于lacZ基因中．
（5）上述目的基因能夠在受體細菌中表達，其原因是不同生物共用一套密碼子．
故答案為：
（1）
（2）DNA連接酶
（3）ABCDEF
（4）青霉素和X-gal     白    D
（5）D

點評 本題結合圖解，考查基因工程的相關知識，要求考生識記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結合題中信息準確答題．