Question

6．某學(xué)習(xí)小組進(jìn)行“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系”的探究實驗．
某生物興趣小組開展探究實驗，課題是“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系”．
實驗材料、用具：菌種和無菌培養(yǎng)液、試管、血球計數(shù)板 （計數(shù)室為1mm×1mm方格，由400個小格組成）、滴管、無菌水、臺盼藍(lán)染液（對活細(xì)胞無染色效果）、顯微鏡等．
（1）本實驗中，某學(xué)生的部分實驗操作過程是這樣的：①把酵母菌培養(yǎng)液放置在適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，第7天開始取樣計數(shù)；②取樣前振蕩試管使得酵母菌分布均勻．用無菌吸管從試管中吸取酵母菌培養(yǎng)液少許；③加入血球計數(shù)板計數(shù)室，再蓋上蓋玻片，并用濾紙吸去多余菌液．請糾正該同學(xué)實驗操作中的兩個錯誤．（指出第幾步，并說出錯誤）
①第1步，第一天開始取樣計數(shù)，連續(xù)7天，進(jìn)行前后對照；
②第3步，先蓋上蓋玻片，再加入血球計數(shù)板計數(shù)室；
（2）本實驗沒有另設(shè)對照實驗，原因是該實驗在時間上形成前后對照．該實驗需要（填“需要”或“不需要”） 重復(fù)實驗，原因是避免實驗偶然性帶來的誤差．
（2）在吸取培養(yǎng)液計數(shù)前，要輕輕震蕩幾次試管，原因是使酵母菌分布均勻．
（3）某同學(xué)第5天在使用血球計數(shù)板計數(shù)時做法如下：
①振蕩搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋（稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍(lán)染液）．
②先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙（吸水紙）吸去，制作好臨時裝片．
③顯微鏡下觀察計數(shù)：在觀察計數(shù)時只計不被（填“被”或“不被”）染成藍(lán)色的酵母菌．在用血球計數(shù)板對某一稀釋10倍樣品進(jìn)行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)在一個小方格內(nèi)（蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm）酵母菌平均數(shù)為5，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌2×10⁹．

Answer 1

分析 本題研究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的關(guān)系，其自變量為時間，因變量為酵母菌種群數(shù)量．
酵母菌可以用液體培養(yǎng)基來培養(yǎng)，培養(yǎng)液中的酵母菌種群的增長情況與培養(yǎng)液中的成分、空間、pH、溫度等因素有關(guān)，可以根據(jù)培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量和時間為坐標(biāo)軸做曲線，從而掌握酵母菌種群數(shù)量的變化情況．
利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)是一種常用的細(xì)胞計數(shù)法，這種方法可以直接測定樣品中全部的細(xì)胞數(shù)目，所以一般用于單細(xì)胞微生物數(shù)量的測定，由于血球計數(shù)板上的計數(shù)室蓋上蓋玻片后的容積是一定的，所以可根據(jù)在顯微鏡下觀察到的細(xì)胞數(shù)目來計算單位體積的細(xì)胞的總數(shù)目．

解答 解：（1）該同學(xué)實驗操作中有兩個錯誤：①第1步，第一天開始取樣計數(shù)，連續(xù)7天，進(jìn)行前后對照；②第3步，先蓋上蓋玻片，再加入血球計數(shù)板計數(shù)室．
（2）該實驗在時間上形成前后對照，沒有另設(shè)對照實驗．為了避免實驗偶然性帶來的誤差，該實驗需要重復(fù)實驗．
（3）在吸取培養(yǎng)液計數(shù)前，要輕輕震蕩幾次試管，使酵母菌分布均勻．
（4）某同學(xué)第5天在使用血球計數(shù)板計數(shù)時做法如下：
①振蕩搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并適當(dāng)稀釋（稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍(lán)染液）．
②先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙（吸水紙）吸去，制作好臨時裝片．
③顯微鏡下觀察計數(shù)：被染成藍(lán)色的酵母菌為死細(xì)胞，在觀察計數(shù)時只計不被染成藍(lán)色的酵母菌．在用血球計數(shù)板對某一稀釋10倍樣品進(jìn)行計數(shù)時，發(fā)現(xiàn)在一個小方格內(nèi)酵母菌平均數(shù)為5，據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌5×400÷10^-4×10×10=2×10⁹．
故答案為：
（1）①第1步，第一天開始取樣計數(shù)，連續(xù)7天，進(jìn)行前后對照．
②第3步，先蓋上蓋玻片，再加入血球計數(shù)板計數(shù)室．
（2）該實驗在時間上形成前后對照  　需要　 避免實驗偶然性帶來的誤差（或其他合理答案）
（3）使酵母菌分布均勻
（4）②蓋玻片 　　  ③不被      2×10⁹

點評 本題考查了探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化的實驗方面的相關(guān)知識，要求考生掌握調(diào)查的方式和實驗過程中的相關(guān)注意點；學(xué)會酵母菌計數(shù)的方法，并能利用公式對數(shù)量進(jìn)行計算，難度適中．