Question

圖甲乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點，Amp^r表示氨芐青霉素抗性基因，Ne^r表示新霉素抗性基因．下列敘述正確的是（　�。�

• A、用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒
• B、圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個游離的磷酸基團
• C、在構(gòu)建重組質(zhì)粒時，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNA
• D、導入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：質(zhì)粒和外源DNA分子都含有三種限制酶切點，即限制酶BamHⅠ、PstⅠ和Hind III，其中BamHⅠ切割位點在目的基因上，所以不能用該酶切割外源DNA了．用PstⅠ和Hind III酶切質(zhì)粒切成兩個片段，用PstⅠ和Hind III酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過DNA連接酶與質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個重組質(zhì)粒無目的基因，不符合要求．導入目的基因的大腸桿菌，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的，其中的Amp^r（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，不能抗氨芐青霉素．

解答： 解：A、用PstⅠ和Hind III酶切質(zhì)粒切成兩個片段，一個含Ne^r抗性基因，另一個不含抗性基因；用PstⅠ和Hind III酶能將外源DNA切成三段，只有含目的基因的片段通過DNA連接酶與含Ne^r抗性基因質(zhì)粒連接形成的重組質(zhì)粒符合要求，而另一個重組質(zhì)粒無抗性基因，不符合要求，A正確；
B、圖甲中的質(zhì)粒只有一個BamHⅠ切割位點，切割后形成一個直鏈DNA，含2個游離的磷酸基團，B錯誤；
C、BamHⅠ切割位點在目的基因上，不能用該酶切割外源DNA，C錯誤；
D、導入目的基因的大腸桿菌，其重組質(zhì)粒是用PstⅠ和Hind III酶切割的，其中的Amp^r（氨芐青霉素抗性基因）已被破壞，D錯誤．
故選：A．

點評：本題結(jié)合題圖，考查基因工程的相關(guān)知識，意在考查考生分析題圖提取有效信息的能力，識記環(huán)狀DNA分子中無游離的磷酸基團，而鏈狀DNA分子中含有2個游離的磷酸基團；識記基因表達載體中必須含有抗性基因．