Question

多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果膠使細胞壁破損．成熟的番茄果實中，PG合成顯著增加，能使果實變紅變軟，但不利于保鮮．利用基因工程減少PG基因的表達，可延長果實保質期．科學家將PG基因反向接到Ti質粒上，導入番茄細胞中，得到轉基因番茄，具體操作流程如圖．據圖回答下列問題：
（1）若已獲取PG的mRNA，可通過

 

獲取PG基因．
（2）用含目的基因的農桿菌感染番茄原生質體后，可用含有

 

的培養(yǎng)基進行篩選，理由是

 

．
（3）將轉入反向鏈接PG基因的番茄細胞培育成完整的植株，需要用

 

技術；其中，愈傷組織經

 

形成完整植株．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術,植物培養(yǎng)的條件及過程

專題：

分析：基因工程技術的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成．
（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等．
（3）將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣．將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法．
（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答： 解：（1）若已獲取PG的mRNA，可通過逆轉錄法獲取PG基因．
（2）由圖可知，重組質粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞，因此用含目的基因的農桿菌感染番茄原生質體后，可用含有卡那霉素的培養(yǎng)基進行篩選．
（3）將轉基因番茄細胞培育成完整植株需采用植物組織培養(yǎng)技術，其過程為轉基因番茄細胞

脫分化

愈傷組織

再分化

胚狀體→轉基因番茄．
故答案為：
（1）逆轉錄法  
（2）卡那霉素    重組質粒中含卡那霉素抗性基因而四環(huán)素抗性基因被破壞
（3）植物組織培養(yǎng)    再分化

點評：本題結合圖解，考查基因工程和植物組織培養(yǎng)的相關知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的過程及應用，能結合圖中信息準確答題．