Question

長(zhǎng)期以來(lái) ,香蕉生產(chǎn)遭受病害的嚴(yán)重威脅 ,制約了其發(fā)展。目前 ,隨著轉(zhuǎn)基因抗病香蕉基因工程技術(shù)的日趨成熟 ,為培育抗病香蕉品種開(kāi)辟了新途徑。轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過(guò)程如圖所示，質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點(diǎn)。請(qǐng)回答：

(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時(shí)，應(yīng)選用限制酶             ，對(duì)          進(jìn)行切割。
(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有         ，作為標(biāo)記基因。
（3）能使抗病基因在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控序列是：     (填字母序號(hào))。
A.啟動(dòng)子   B.終止子  C.復(fù)制原點(diǎn)   D.標(biāo)記基因
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞常用方法有多種，圖中所示方法為         。
（5）欲檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可采用的技術(shù)是       ，欲檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可采用的技術(shù)是     ，欲檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，可采用的技術(shù)       (填字母序號(hào)，各1分)。
A.分子雜交技術(shù)   B. DNA分子雜交技術(shù)    C. 抗原-抗體雜交技術(shù)   D. PCR

Answer 1

（1）PstⅠ、 EcoRⅠ（答全給分）  含抗病基因的DNA、質(zhì)粒（答全給分）
（2）抗卡那霉素基因
（3）AB
（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
(5)B  A  C(各1分)

解析試題分析：
（1）根據(jù)圖示，選用限制酶切割時(shí)不能破壞抗病基因，所以應(yīng)選用PstⅠ和EcoRⅠ對(duì)含有抗病基因的DNA和質(zhì)粒進(jìn)行切割。
（2）因?yàn)榕囵B(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，所以如果想利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有抗卡那霉素基因，以便作為標(biāo)記基因，進(jìn)行篩選。
（3）抗病基因必需具有調(diào)控序列：?jiǎn)��?dòng)子和終止子，才能在香蕉細(xì)胞中特異性表達(dá)。
（4）將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法，圖中采用的是最常用的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。
（5）檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，可采用的方法有DNA分子雜交技術(shù)、分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)。其中檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因應(yīng)用DNA分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，應(yīng)用分子雜交技術(shù)，檢測(cè)目的基因是否表達(dá)成功，應(yīng)用抗原-抗體雜交技術(shù)。
考點(diǎn)：本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。