Question

要獲得遺傳特性單一的枯草桿菌菌種，一般必須對原有的菌種進行擴大培養(yǎng)、并利用純化技術得到單菌落的菌種。請回答以下問題：

⑴獲得純凈枯草桿菌的關鍵是  ，為此，必須對培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進行嚴格滅菌。在接種或倒平板操作時，除了在超凈臺上進行操作并對實驗者的衣著、手和實驗空間進行嚴格清潔和消毒外，還必須  ，以防止空氣中的雜菌污染。

⑵下圖是純化枯草桿菌的方法，該純化分離方法的名稱是  。

⑶枯草桿菌可以產生α-淀粉酶，以下是利用誘變育種方法培育獲得產

生較多淀粉酶菌株的主要實驗步驟。（原理：菌株生長過程中可釋放淀

粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈。）

第一步：將枯草桿菌接種到液體培養(yǎng)基上進行擴大培養(yǎng)。

第二步：將枯草桿菌分成A、B兩組，  。

第三步：制備多個含淀粉的固體培養(yǎng)基。

第四步：將A、B組分別稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用  法分離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落。

第五步：觀察A、B組各菌落周圍的    。

實驗結果預期：據誘發(fā)突變率低的特點，預期  ；

據誘發(fā)突變不定向性的特點，預期  。

 

Answer 1

【答案】

（1）防止外來雜菌的侵入        在酒精燈火焰旁操作

（2）平板劃線法

（3）A 組用誘變劑處理，B組不處理（作對照）   稀釋涂布法    透明圈大小    A組多數菌落周圍的透明圈與B組差異不顯著

A組有少數菌落周圍的透明圈比B組明顯小，有少數比B組明顯大（或A組透明圈大小不一，B組較一致）

【解析】

試題分析：

⑴獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是防止外來雜菌的侵入，因此必須對培養(yǎng)皿、接種用具和培養(yǎng)基進行嚴格滅菌。在接種或倒平板操作時，除了在超凈臺上進行操作并對實驗者的衣著、手和實驗空間進行嚴格清潔和消毒外，還必須在酒精燈火焰旁操作，以防止空氣中的雜菌污染。

⑵由圖可知，該處純化分離枯草桿菌的方法是平板劃線法。

⑶本實驗的目的是利用誘變育種方法培育獲得產生較多淀粉酶菌株。實驗設計時要遵循對照原則和單一變量原則，所以要設計空白對照組，單一變量是誘變劑處理與否，即將枯草桿菌分成A、B兩組，A 組用誘變劑處理，B組不處理（作對照）。將A、B組分別進行一系列梯度的稀釋后，分別在含淀粉的固體培養(yǎng)基上利用稀釋涂布法分離，適宜條件下培養(yǎng)得到單菌落。本實驗的原理是：菌株生長過程中可釋放淀粉酶分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈。所以實驗最后可以通過觀察A、B組各菌落周圍的透明圈大小做出判斷。因為誘發(fā)突變率低，預期A組多數菌落周圍的透明圈與B組差異不顯著；誘發(fā)突變具有不定向性，預期A組透明圈大小不一，B組較一致。

考點：本題考查微生物實驗室培養(yǎng)的相關知識，意在考查考生理解所學知識的要點，把握知識間內在聯系的能力；能獨立完成“生物知識內容表”所列的生物實驗，包括理解實驗目的、原理、方法和操作步驟，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用。