Question

6．滅活的腫瘤細(xì)胞可作為疫苗用以提高機(jī)體對(duì)該類(lèi)型腫瘤的免疫力．研究者利用熱休克蛋白（HSP70）基因轉(zhuǎn)入白血病細(xì)胞株（HL-60）制備疫苗并研究該疫苗的作用，過(guò)程及結(jié)果如下．

（1）構(gòu)建HSP70基因表達(dá)載體時(shí)需使用的工具酶有限制酶和DNA連接酶．在目的基因前需添加信號(hào)肽所對(duì)應(yīng)的編碼序列，信號(hào)肽可引導(dǎo)剛翻譯出的HSP70進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（細(xì)胞器），并最終使HSP70定位于HL-60細(xì)胞的表面．用抗HSP70的抗體（抗原-抗體雜交技術(shù)）檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)，只有③組的HL-60細(xì)胞表面具有HSP70．設(shè)置②組作為對(duì)照，目的是排除空載體對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響．
（2）據(jù)A項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果可知，膜表面具有HSP70的HL-60細(xì)胞能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖．
（3）乳酸脫氫酶存在于每個(gè)細(xì)胞中，正常情況下很難透過(guò)細(xì)胞膜．在B項(xiàng)檢測(cè)中，48h后加入的HL-60細(xì)胞成為細(xì)胞裂解的對(duì)象，因而培養(yǎng)液中的乳酸脫氫酶含量可直接反映效應(yīng)T效應(yīng)T細(xì)胞裂解靶細(xì)胞的能力．
（4）綜上所述，HSP70能增強(qiáng)白血病腫瘤疫苗引起機(jī)體產(chǎn)生（特異性）免疫的能力，為白血病細(xì)胞治療和預(yù)防復(fù)發(fā)的帶來(lái)希望．

Answer 1

分析 分析圖1：①②兩組作為對(duì)照組，③作為實(shí)驗(yàn)組，A項(xiàng)檢測(cè)T淋巴細(xì)胞的增殖能力，B項(xiàng)檢測(cè)培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶的含量．
分析圖2：①②中A項(xiàng)檢測(cè)和B項(xiàng)檢測(cè)的結(jié)果相同，而③中A項(xiàng)檢測(cè)和B項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果均明顯高于①②，A項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果說(shuō)明膜表面具有HSP70的HL-60細(xì)胞能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，B項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果可直接反映效應(yīng)T效應(yīng)T細(xì)胞裂解靶細(xì)胞的能力．

解答 解：（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先需要限制酶切割外源DNA分子和運(yùn)載體，其次需要DNA連接酶將目的基因和運(yùn)載體連接形成重組DNA分子．在目的基因前需添加信號(hào)肽所對(duì)應(yīng)的編碼序列，信號(hào)肽可引導(dǎo)剛翻譯出的HSP70進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，并最終使HSP70定位于HL-60細(xì)胞的表面．檢測(cè)目的基因是否翻譯形成相應(yīng)的蛋白質(zhì)，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．設(shè)置②組作為對(duì)照，目的是排除空載體對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響．
（2）據(jù)A項(xiàng)檢測(cè)結(jié)果可知，轉(zhuǎn)入HSP70基因表達(dá)載體的HL-60，T淋巴細(xì)胞增殖能力明顯增強(qiáng)，這說(shuō)明膜表面具有HSP70的HL-60細(xì)胞能促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖．
（3）乳酸脫氫酶存在于每個(gè)細(xì)胞中，正常情況下很難透過(guò)細(xì)胞膜，但若細(xì)胞被裂解，乳酸脫氫酶即可從細(xì)胞出來(lái)，導(dǎo)致培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶的含量升高．因此在B項(xiàng)檢測(cè)中，48h后加入的HL-60細(xì)胞成為細(xì)胞裂解的對(duì)象，培養(yǎng)液中的乳酸脫氫酶含量可直接反映效應(yīng)T效應(yīng)T細(xì)胞裂解靶細(xì)胞的能力．
（4）綜上所述，HSP70能增強(qiáng)白血病腫瘤疫苗引起機(jī)體產(chǎn)生（特異性）免疫的能力，為白血病細(xì)胞治療和預(yù)防復(fù)發(fā)的帶來(lái)希望．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶    內(nèi)質(zhì)網(wǎng)     抗HSP70的抗體（抗原-抗體雜交技術(shù)）     排除空載體對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響
（2）促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖
（3）效應(yīng)T效應(yīng)T細(xì)胞裂解靶細(xì)胞
（4）細(xì)胞治療和預(yù)防復(fù)發(fā)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程及相關(guān)的探究實(shí)驗(yàn)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟；掌握探究實(shí)驗(yàn)的原則，能根據(jù)圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱理解層次的考查．