Question

2．根據(jù)所學(xué)微生物的實驗室培養(yǎng)和應(yīng)用知識，完成下列問題．
（1）通常情況下，在微生物培養(yǎng)過程中，實驗室常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌．
（2）錐形瓶接種過程應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基．對無菌操作時用到的玻璃器皿要用干熱滅菌的方法徹底消滅其中的微生物，用酒精擦拭不能達(dá)到目的．
（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)．
（4）平板劃線操作（如圖所示）時要做到以下幾點：
①第一次劃線及每次劃線之前都需要對接種環(huán)進(jìn)行灼燒滅菌，待接種環(huán)冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種．
②劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相交
③劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破．
（5）土壤中細(xì)菌之所以能分解尿索，是由于它們體內(nèi)能合成脲酶，這種物質(zhì)在把尿素分解成無機(jī)物的過程中起到徨化作用．統(tǒng)計樣品中的分解尿素的活菌一般用稀釋涂布平板法法，具體的操作流程是土壤取樣→樣品的稀釋→微生物的培養(yǎng)與觀察 細(xì)菌的計數(shù)．
（6）統(tǒng)計的苗落往往比活菌的實際數(shù)目低，這是因為菌落可能有兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成，所以實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多．

Answer 1

分析 微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作技術(shù)，無菌操作過程中的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌．高壓蒸汽滅菌適用于對一般培養(yǎng)基和玻璃器皿的滅菌．干熱滅菌適用于空玻璃器皿的滅菌，凡帶有橡膠的物品和培養(yǎng)基，都不能進(jìn)行干熱滅菌．無菌室緩沖間和接種箱常用紫外線燈作空氣滅菌．微生物接種時的金屬接種工具和試管口可以用灼燒滅菌．從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．

解答 解：（1）實驗室中常用的滅菌方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌法滅菌等．
（2）空氣中含有細(xì)菌的孢子等，乙醇接種過程中要在酒精燈火焰旁進(jìn)行；玻璃器皿適宜用干熱滅菌的方式進(jìn)行滅菌．
（3）將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，通過涂布接種，將菌液接種到最終達(dá)到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)，這樣聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，在固體培養(yǎng)基上形成單菌落，從而達(dá)到純化的目的．
（4）①接種用的接種環(huán)等金屬工具適宜用灼燒滅菌，待接種環(huán)冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種．
②劃線時最后一區(qū)不要與第一區(qū)相交重合，否則不能分理處純種．
③劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破．
（5）尿素分解菌能夠分泌內(nèi)膜將尿素分解．稀釋涂布平板法適宜用活菌的計數(shù)統(tǒng)計．從土壤中分離微生物的一般步驟是：土壤取樣、選擇培養(yǎng)、梯度稀釋、涂布培養(yǎng)和篩選菌株．
（6）由于稀釋涂布平板法接種的菌落可能有兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成，所以實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多．
故答案為：
（1）干熱滅菌    灼燒滅菌
（2）瓶口的微生物    干熱滅菌
（3）濃度梯度    瓊脂固體培養(yǎng)基
（4）①灼燒滅菌    溫度太高殺死菌種
②相交
③培養(yǎng)基
（5）脲酶   稀釋涂布平板法    樣品的稀釋
（6）菌落可能有兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成，所以實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多

點評 本題主要考查無菌操作和微生物的篩選與培養(yǎng)，意在強化學(xué)生對相關(guān)知識的識記、理解與運用．