Question

金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾�。�金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色．如圖為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關問題．

（1）操作中在血平板上的接種方法是

 

，接種操作前后需要對接種工具進行

 

滅菌．
（2）用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)的主要目的是

 

．
（3）在制備血平板時需將pH調(diào)節(jié)至

 

（“微酸性”或“微堿性”）后滅菌，待培養(yǎng)基

 

后，再加入適量血液．按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于

 

培養(yǎng)基．
（4）多次規(guī)范操作、重復實驗，血平板上均出現(xiàn)

 

的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，需要對本次操作進行完善，完善的方案是

 

．
（5）為了檢測其中某種菌對于抗生素的敏感性，取該單菌落適當稀釋，接種于固體培養(yǎng)基表面，使其均勻生長，布滿平板．將分別含有A、B兩種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A

 

；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該病菌對抗生素B

 

．為方便后續(xù)使用該菌種，可將菌液用

 

的方法長期保存．

Answer 1

考點：微生物的分離和培養(yǎng),培養(yǎng)基對微生物的選擇作用

專題：

分析：（1）微生物的營養(yǎng)物質(zhì)有5類，分別是水、無機鹽、碳源、氮源及生長因子．
（2）培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：
①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物（如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽）
②鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品，鑒別不同種類的微生物，如可用伊紅-美藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌（若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤）
（3）接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．
（4）對相應抗生素敏感的細菌，在含有抗生素的培養(yǎng)基上不能生長；反之，則能生長．

解答： 解：（1）使用接種環(huán)進行接種應該只用平板劃線法；接種工具滅菌的方式是灼燒滅菌．
（2）用7.5%NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)的主要目的是分離出金黃色葡萄球菌．
（3）血液是堿性的，所以培養(yǎng)基應該調(diào)至堿性；滅菌法方法是高壓蒸汽滅菌法，所以應該等到培養(yǎng)基冷卻后加入血液，否則會破壞血細胞；由于該培養(yǎng)基能夠鑒別是否含有葡萄球菌，所以屬于鑒別培養(yǎng)基．
（4）根據(jù)題意，“金黃色葡萄球菌在血平板（培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色”，所以如果經(jīng)多次規(guī)范操作、重復實驗，血平板上均出現(xiàn)透明圈的菌落，說明初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌；但這個實驗要這是對照實驗，對照實驗的設計是在培養(yǎng)基中不加鮮牛奶．
（5）對相應抗生素敏感的細菌，在含有抗生素的培養(yǎng)基上不能生長；反之，則能生長．含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A敏感；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B不敏感；菌種長期保存，用甘油管藏的方法．
故答案為：（1）平板劃線法      灼燒    
（2）分離出金黃色葡萄球菌
（3）微堿性   冷卻     鑒別
（4）周圍存在透明圈    設置不加鮮牛奶其他操作均相同的對照組
（5）敏感  不敏感  甘油管藏

點評：在本題中設置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結果的影響，提高實驗結果的可信度，對照實驗的設計的重點是單一變量原則，在本題中單一變量的原則的設計是在培養(yǎng)基中是否加入鮮牛奶．