Question

16．2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家．綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能．如圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）過(guò)程②中必須用同種限制酶對(duì)Ti質(zhì)粒和綠色熒光蛋白基因進(jìn)行切割．
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是顯微注射法．
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因．獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免免疫排斥反應(yīng)．
（4）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是②①③④（用數(shù)字表示）．
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程，其中①表示目的基因的獲��；②為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程；③是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過(guò)程．之后還采用了核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)．

解答 解：（1）基因工程中，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要用同種限制酶切割外源DNA分子和運(yùn)載體，以形成相同的黏性末端．
（2）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）標(biāo)記基因的作用是鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因．利用轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)可以在器官移植中避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)．
（4）蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；以下按照基因工程的一般步驟進(jìn)行．因此，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是：②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列；①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸；③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）；④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白．
故答案為：
（1）同種限制酶
（2）顯微注射法
（3）標(biāo)記基因     免疫排斥反應(yīng)
（4）②①③④

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程圖，考查基因工程、蛋白質(zhì)工程、動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，能準(zhǔn)確判斷圖中各過(guò)程的名稱；識(shí)記蛋白質(zhì)工程的基本途徑；識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)和胚胎工程技術(shù)的相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合題圖答題．