Question

19．一對(duì)表現(xiàn)型正常的夫婦，生了一個(gè)β地中海貧血癥患兒．在他們欲生育第二胎時(shí)，發(fā)現(xiàn)妻子的雙側(cè)輸卵管完全堵塞，不能完成體內(nèi)受精．醫(yī)生為該夫婦實(shí)施了體外受精和產(chǎn)前基因診斷，最終喜獲一健康女嬰．請(qǐng)回答：
（1）哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精 等主要步驟．
（2）在對(duì)胎兒進(jìn)行β地中海貧血癥的產(chǎn)前基因診斷時(shí)，要先從羊水中的胎兒細(xì)胞提取DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后用限制酶對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行切割，產(chǎn)生多個(gè)片段的酶切產(chǎn)物，再根據(jù)不同長(zhǎng)度的酶切產(chǎn)物在電泳時(shí)移動(dòng)的速率不同，形成不同的電泳條帶進(jìn)行判斷．
①PCR擴(kuò)增與體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程中，解旋的方法不同，前者通過(guò)高溫解開(kāi)雙鏈，后者通過(guò)解旋酶解開(kāi)雙鏈．
②一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列，大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成．DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式，即黏性末端和平末端．當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開(kāi)時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端．
③利用PCR擴(kuò)增目的基因也是目的基因獲取的方法之一，除此以外，目的基因還可以從基因文庫(kù)中獲取，基因文庫(kù)包含部分基因文庫(kù) 和基因組文庫(kù) 等類型，后者的基因中含有啟動(dòng)子．
④基因診斷的主要原理是DNA分子雜交（不可答“堿基互補(bǔ)配對(duì)”）．

Answer 1

分析 1、PCR的過(guò)程：①高溫變性：DNA解旋過(guò)程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈．PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開(kāi)不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開(kāi)．
2、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．形成黏性末端和平末端兩種．
3、基因診斷技術(shù)它的基本原理是：互補(bǔ)的DNA單鏈能夠在一定條件下結(jié)合成雙鏈，即能夠進(jìn)行雜交．這種結(jié)合是特異的，即嚴(yán)格按照堿基互補(bǔ)的原則進(jìn)行，它不僅能在DNA和DNA之間進(jìn)行，也能在DNA和RNA之間進(jìn)行．因此，當(dāng)用一段已知基因的核酸序列作出探針，與變性后的單鏈基因組DNA接觸時(shí)，如果兩者的堿基完全配對(duì)，它們即互補(bǔ)地結(jié)合成雙鏈，從而表明被測(cè)基因組DNA中含有已知的基因序列．

解答 解：（1）哺乳動(dòng)物的體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精等主要步驟．
（2）①PCR擴(kuò)增與體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程中，解旋的方法不同，前者通過(guò)高溫解開(kāi)雙鏈，后者通過(guò)解旋酶解開(kāi)雙鏈．
②大多數(shù)限制酶的識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成．DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式，即黏性末端和平末端．當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開(kāi)時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端．
③基因文庫(kù)包含部分基因文庫(kù)和基因組文庫(kù)

文庫(kù)類型	cDNA	基因組文庫(kù)
文庫(kù)大小	小	大
基因中啟動(dòng)子	無(wú)	有
基因中內(nèi)含子	無(wú)	有
基因多少	某種生物的部分基因	某種生物的全部基因
物種間的基因交流	可以	部分基因可以

④基因診斷的主要原理是DNA分子雜交．
故答案為：
（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)      精子的采集和獲能     受精
（2）①高溫    解旋酶      
②6    黏性末端
③部分基因文庫(kù)    基因組文庫(kù)       
④DNA分子雜交（不可答“堿基互補(bǔ)配對(duì)”）

點(diǎn)評(píng) 本題考查體外受精技術(shù)、基因工程的原理及技術(shù)，要求考生識(shí)記體外受精技術(shù)具體步驟；識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．